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本文作者：程林劉楠張逸仙葉成斌魏増玉劉勇作者單位：福建醫(yī)科大學(xué)協(xié)和臨床醫(yī)學(xué)院

腦卒中的高患病率、高致殘率和高死亡率不僅危害人類的健康，影響生活質(zhì)量，而且給家庭和社會(huì)帶來了沉重的負(fù)擔(dān)［1］。近年來，康復(fù)醫(yī)學(xué)取得了驚人的發(fā)展，康復(fù)訓(xùn)練能夠改善患者運(yùn)動(dòng)、感覺功能，促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)，提高生活自理能力，已逐漸被人們所接受。本課題旨在探討跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)腦缺血大鼠的療效，為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1材料和方法

1．1實(shí)驗(yàn)材料

1．1．1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：體重為220～250g的成年雄性Sprague－Dawley（SD）大鼠36只，由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供。

1．2．2實(shí)驗(yàn)主要儀器與試劑

主要儀器：電動(dòng)跑臺(tái)儀（美國(guó)哥倫布公司）、電子秤（OHAUS公司）；主要試劑：氯化四唑（TTC，Sigma公司）、水合氯醛（中國(guó)醫(yī)藥上?；瘜W(xué)試劑公司）。

1．2實(shí)驗(yàn)方法

1．2．1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組：取體重為220～250g健康清潔級(jí)雄性SD大鼠36只，隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、運(yùn)動(dòng)組，每組12只。

1．2．2大腦中動(dòng)脈閉塞（MCAO）模型制備：線栓和MCAO模型制備參考改良Longa線栓法［2］和本課題組前期所用方法［3］。模型成功的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)參考Longa及Bederson等［2，4］的方法，評(píng)分為1～3分的大鼠入選本次研究，通過隨機(jī)抽樣原則補(bǔ)齊剔除大鼠并重新造模。

1．2．3跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練：跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練方式參照本課題組前期所用方法［5］。

1．2．4神經(jīng)功能評(píng)價(jià)：分別于造模后4d、7d、14d、28d對(duì)各組大鼠采用修訂的神經(jīng)功能評(píng)分（mNSS）方法進(jìn)行評(píng)分。它包括運(yùn)動(dòng)、感覺、反射和平衡4部分，總分為0～18分，分值越大，神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重，正常大鼠為0分。

1．2．5大鼠體重測(cè)量：分別于術(shù)前1d、術(shù)后4d、7d、14d、28d測(cè)定大鼠體重，每只大鼠每個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)量體重1次，重復(fù)3次，取平均值。1．2．6腦梗死體積測(cè)量：造模成功后7d、28d，大鼠開顱取腦、－20℃冰箱速凍15min，按2mm的厚度，快速冠狀切片5～6片，置于37℃預(yù)熱后的2％TTC磷酸緩沖液中恒溫避光孵育30min，數(shù)碼相機(jī)拍照后用IPP軟件分析并計(jì)算大鼠腦梗死體積。

1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS13．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均經(jīng)過方差齊性檢驗(yàn)和正態(tài)性檢驗(yàn)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x珚±s）表示，相同時(shí)間點(diǎn)的比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)或單因素方差分析，P＜0．05表示差異有顯著性。

2結(jié)果

2．1大鼠神經(jīng)功能mNSS評(píng)分

大鼠造模成功后4d，7d，運(yùn)動(dòng)組和模型組之間神經(jīng)功能評(píng)分（mNSS評(píng)分）差異無顯著性。MCAO后14d、28d，運(yùn)動(dòng)組mNSS評(píng)分明顯低于模型組（P＜0．05或＜0．01），見表1。

2．2大鼠體重變化情況

造模前，各組大鼠體重差異無顯著性；造模后4d、7d、14d和28d，模型組體重顯著低于假手術(shù)組（P＜0．01）；造模后7d、14d和28d，運(yùn)動(dòng)組體重顯著高于模型組（P＜0．05或＜0．01），見表2。

2．3大鼠腦梗死體積

造模成功后7d，運(yùn)動(dòng)組和模型組之間腦梗死體積差異無顯著性；造模成功后28d，運(yùn)動(dòng)組腦梗死體積明顯小于模型組（P＜0．05），見表3。

3討論

腦卒中是人類的常見病和多發(fā)病，近年來，隨著社會(huì)的進(jìn)步和醫(yī)學(xué)的發(fā)展，腦卒中的死亡率有明顯下降的趨勢(shì)，但致殘率仍居高不下，仍達(dá)80％以上，其中，缺血性腦卒中占絕大多數(shù)，如何降低其致殘率仍是神經(jīng)病學(xué)界的一大難題。

目前認(rèn)為，急性缺血性腦卒中的處理應(yīng)強(qiáng)調(diào)早期診斷、早期治療、早期康復(fù)和早期預(yù)防再發(fā)［6，7］。

跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練是腦缺血大鼠康復(fù)治療重要的實(shí)驗(yàn)研究手段，大鼠跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練方式的優(yōu)點(diǎn)主要有以下幾點(diǎn)：（1）運(yùn)動(dòng)方式符合大鼠日常的運(yùn)動(dòng)情況；（2）大鼠在各自的通道內(nèi)進(jìn)行獨(dú)立運(yùn)動(dòng)，不會(huì)彼此干擾，使彼此之間的影響因素較少；（3）與游泳、運(yùn)動(dòng)轉(zhuǎn)鼓、跳臺(tái)等運(yùn)動(dòng)方式相比，跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可以更加精確地調(diào)控大鼠運(yùn)動(dòng)負(fù)荷、跑臺(tái)坡度和速度等。腦可塑性和大腦功能重組理論是康復(fù)治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）損傷最重要的基礎(chǔ)理論。運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練有助于維持腦的功能和促進(jìn)腦的可塑性，使其對(duì)缺血等腦損傷具有更好的抵抗力，本研究采用電動(dòng)跑臺(tái)儀對(duì)腦缺血大鼠進(jìn)行康復(fù)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)組大鼠造模后14d、28d神經(jīng)功能評(píng)分明顯優(yōu)于模型組大鼠，提示早期康復(fù)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練有助于大鼠神經(jīng)功能的恢復(fù)，這與之前研究結(jié)果基本一致［5］，其機(jī)制可能與運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練改善大鼠腦缺血區(qū)微環(huán)境，抑制神經(jīng)元凋亡，促進(jìn)神經(jīng)再生有關(guān)。本研究還觀察到造模后大鼠體重明顯減輕，運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練可以促進(jìn)大鼠體重的恢復(fù)，與造模后神經(jīng)功能缺損呈顯著性相關(guān)，可以考慮用體重作為腦缺血模型成功與否的一個(gè)監(jiān)測(cè)指標(biāo)，同時(shí)可作為大鼠缺血性腦卒中后的一個(gè)恢復(fù)指標(biāo)。

TTC是一種脂溶性光敏感復(fù)合物，同時(shí)是呼吸鏈中吡啶－核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體，與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)呈紅色，而缺血組織中由于脫氫酶活性降低，不能反應(yīng)，故呈白色，常用于動(dòng)物腦缺血模型后腦梗死體積的計(jì)算。本研究還發(fā)現(xiàn)，跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練后28d時(shí)，大鼠腦梗死體積較模型組明顯減小，推測(cè)這可能與運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練促進(jìn)腦組織神經(jīng)軸突再生［8］和血管再生有關(guān)。

綜上所述，康復(fù)訓(xùn)練可以促進(jìn)大鼠受損后神經(jīng)功能的恢復(fù)，加快其體重恢復(fù)，減小其腦梗死體積，其具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。