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7月份老總派我去豐城市做市場調(diào)查,8月份又被委以重任——到高安某豬場做對(duì)比實(shí)證,并銷售10噸料。工作成果不是很理想,但是也得到了總經(jīng)理以及分經(jīng)理等各位領(lǐng)導(dǎo)的認(rèn)可?,F(xiàn)在就將我在暑假實(shí)習(xí)中的工作方法簡單地分享給大家,希望能對(duì)大家有所幫助。
一、如何做飼料市場調(diào)查
飼料市場調(diào)查主要分兩個(gè)部分: ①生豬養(yǎng)殖規(guī)模調(diào)查 ②各品牌飼料的市場占有份額
①生豬養(yǎng)殖規(guī)模調(diào)查:生豬養(yǎng)殖規(guī)模主要以母豬存欄量作為衡量標(biāo)準(zhǔn),所以,為了統(tǒng)計(jì)上的方便,可將母豬存欄劃分成四個(gè)范圍,即存欄量在50頭以下的(一般歸結(jié)為散戶)、50~100頭、10~200頭、200頭以上的,直接統(tǒng)計(jì)各個(gè)范圍有多少養(yǎng)殖戶就ok啦!調(diào)查應(yīng)從畜牧水產(chǎn)局入手,各個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的畜牧獸醫(yī)站,各村的村長、書記,最后是飼料經(jīng)銷商,從這些地方獲得自己所需要的生豬養(yǎng)殖規(guī)模數(shù)據(jù),當(dāng)然,也要走訪一些養(yǎng)殖戶并記錄這些豬場的用料情況以及豬場老板的一些信息。所得數(shù)據(jù)每周整理,最后匯總做成圖表。
②各品牌飼料的市場占有份額:走訪各鄉(xiāng)鎮(zhèn)的飼料經(jīng)銷商,記錄經(jīng)銷商的地址、聯(lián)系電話、以及所經(jīng)銷的飼料品牌種類和月銷量。具體可將飼料分為濃縮料、預(yù)混料和全價(jià)料三個(gè)類別,每個(gè)類別再細(xì)分成妊娠母豬料、哺乳母豬料、小豬料、種豬料、大豬料和種公豬料六個(gè)小類,分別統(tǒng)計(jì)其銷售價(jià)格和月銷售量。所得數(shù)據(jù)每周整理,最后匯總做成圖表(鄉(xiāng)鎮(zhèn)統(tǒng)計(jì)前5位,縣市統(tǒng)計(jì)前15位)。
最終要形成市場調(diào)查報(bào)告。
二、產(chǎn)品飼養(yǎng)示范與對(duì)比實(shí)證
ⅰ、準(zhǔn)備工作:進(jìn)場前要摸清該豬場的養(yǎng)殖規(guī)模,用料情況(包括飼料種類、喂量、價(jià)格以及該飼料的優(yōu)劣所在),豬場老板的喜好,以及該豬場急需解決的問題。
ⅱ、實(shí)證過程中注意事項(xiàng):
①專人負(fù)責(zé)、專人管理、專人記錄
②緊密跟蹤,既要追蹤過程又要追蹤結(jié)果,發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)處理
③做好與參試人員的關(guān)系
④競爭廠家的每批飼料均應(yīng)抽測存檔,以防作弊
⑤應(yīng)在第一現(xiàn)場及時(shí)記錄數(shù)據(jù),對(duì)比實(shí)驗(yàn)應(yīng)客觀、實(shí)事求是,忌追憶、回憶,記錄表一式兩份,分別保管
⑥保持欄舍干燥,保證充足、清潔的飲水
⑦注意飼料過渡,減少換料應(yīng)激
⑧親自做好點(diǎn)數(shù)、盤料、稱重三大項(xiàng)工作
a.點(diǎn)數(shù) b.盤料 c.稱重(空腹時(shí)先稱對(duì)方的豬)
注:開始與結(jié)束應(yīng)全數(shù)記錄重量和頭數(shù),避免上市時(shí)間不統(tǒng)一和頻繁抓捕。
一個(gè)人在外面工作,最重要的是注意身體,其次才是做好工作!
有四種情況會(huì)阻礙顧客去選購他們所需求的東西,即:不信任、無需求、無幫助、不急需。為什么“不信任”會(huì)排在第一位呢?人與人的交往最基本的就是信任,沒有信任自然就不會(huì)有往來,所以,做銷售最基本的就是要得到客戶的信任!“人們總是那樣討厭向他們推銷,但卻總是那么喜歡去購買”,我們?nèi)绾蔚玫娇蛻舻男湃文??斯賓塞.約翰遜曾說過“銷售的目的就是幫助人們獲得你自己也想獲得的東西”,也就是說我們要“穿著他人的鞋子走路”——即站在他人的立場考慮問題,如何結(jié)合我產(chǎn)品的性能為他人解決問題。到最后你會(huì)發(fā)現(xiàn):當(dāng)你不去追求自己想得到的東西,而是去幫助別人得到他們想得到的東西時(shí),你在經(jīng)濟(jì)上就會(huì)獲得更多的成功,而在生活中也會(huì)有更多的樂趣!
小廠與公司我都干過,在小廠與公司絕對(duì)不一樣,在小廠,臨時(shí)工干上兩個(gè)月可能都無人問津,沒人注意,而在公司比較正規(guī),至少還能認(rèn)識(shí)一些人,還能知道公司里有哪些領(lǐng)導(dǎo),是趕什么的,閑暇之余可以與之交談,溝通一下思想觀念,不要怕害羞,不要怕出錯(cuò),現(xiàn)在學(xué)到的就是財(cái)富,等走到工作崗位上就能派上用場,不至于太迷茫!
在公司里,不管什么企業(yè)他們都是為了追求高效率、高質(zhì)量、高利潤的。因此,干工作要的就是效率,精干高效是每個(gè)企業(yè)家的共求。在這些天里,我得到了這個(gè),干包裝也是為企業(yè)家做事,包裝活雖然簡單與技術(shù)無關(guān),但是它卻有一定的技巧。當(dāng)然了,技巧不是你一開始工作你就能知道的,它需要在實(shí)踐中不斷地摸索。一步一地發(fā)現(xiàn)怎么干就干的快而且干的好,它是一個(gè)慢慢積累的過程。
不論干什么,要多動(dòng)腦,勤動(dòng)手,想法結(jié)合做法提煉出精干高效、簡便易行的方法,講求方法,有條理、有步驟地工作效果會(huì)更好!
在車間里,很多員工一塊工作,再加上天氣炎熱,剛?cè)スぷ饕嚅_口,多問。如果你不太會(huì)說話,話又少,遇到問題需要解決的時(shí)候,你不得不開口,反正早晚都得開口,還是我們爭取主動(dòng)的早一步的好。在車間里,你要用到膠帶,可又不知膠帶在什么地方,這時(shí)候你就需要開口問一下,不要怕害羞,更不要怕出錯(cuò),如果你猶豫不決,總感覺開不了口,那么膠帶永遠(yuǎn)也不會(huì)自己跑到你的手里。
在公司里工作這些天,有時(shí)也會(huì)遇到領(lǐng)導(dǎo),打個(gè)招呼什么的,與領(lǐng)導(dǎo)怎樣交談,應(yīng)該用什么樣的語氣,這些問題都是一些以后常遇到的,僅憑前人的經(jīng)驗(yàn)是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的,我們要從社會(huì)實(shí)踐中慢慢體會(huì)感受。
我們打工不能僅為錢,錢不在多少,打工的目的是提前認(rèn)識(shí)社會(huì),熟悉環(huán)境,完善自我。環(huán)境創(chuàng)造人,環(huán)境改造人,什么樣的環(huán)境就能練出什么樣的人,所以,我們需要認(rèn)知各種各樣的環(huán)境。
調(diào)查對(duì)象:在校大學(xué)生
調(diào)查內(nèi)容:關(guān)于在校大學(xué)生的兼職情況,以及其中所反應(yīng)出來的問題
調(diào)查方法:問卷調(diào)查
目的:大學(xué)生的空閑時(shí)間很多,但是在學(xué)習(xí)理論知識(shí)的同時(shí)又要增強(qiáng)自己的實(shí)踐能力,而兼職是提高大學(xué)生實(shí)踐能力的主要途徑,對(duì)此,為了了解大學(xué)生對(duì)兼職的看法以及選擇兼職工作的類型等,我們開展了此次調(diào)查活動(dòng)。
首先,隨著年齡的增長,越來越多的學(xué)生,尤其是大學(xué)生希望得到更多的認(rèn)可及肯定(包括自身的各方面,學(xué)習(xí),能力等各方面)。這樣的認(rèn)可和肯定在一定的程度上有助于大學(xué)生更好的樹立自己的自信心。每個(gè)人都希望能得到別人的認(rèn)可,尤其是上級(jí)領(lǐng)導(dǎo)的肯定,因此就希望有更多的機(jī)會(huì)在他人面前展示自己。而這樣的機(jī)會(huì)在大學(xué)里面卻很少,且這樣的機(jī)會(huì)也僅限于個(gè)別特別優(yōu)秀、撥尖的學(xué)生。所以,更多的大學(xué)生愿意通過到外面兼職來提高自己,并得到他人的認(rèn)可。
其次,更多的大學(xué)生選擇利用課余時(shí)間去兼職,除了為了得到他人的認(rèn)可,使自己的自信心能倍增外,也希望自己各方面能力能得到更多的“量”上的提高和些許“質(zhì)”上的鍛煉。學(xué)校是有提供機(jī)會(huì)給大學(xué)生去鍛煉的,只是很少,所以大學(xué)生尋求更多的是“量”上的一種提高。而“質(zhì)”上的鍛煉,是在“量”的提高后選擇適合自己,自己有興趣,能夠真正提高鍛煉的兼職工作進(jìn)行實(shí)踐;而通過兼職一個(gè)“量”上的提高自己的能力,在畢業(yè)前的工作實(shí)習(xí)上才有一個(gè)“質(zhì)”上的鍛煉和提高。所以大學(xué)生在選擇兼職的前夕更多的是為了一個(gè)“量”的提高,為實(shí)習(xí)工作做一個(gè)“質(zhì)”的鋪墊。
第三,大學(xué)生愿意去兼職,是為了擴(kuò)開自己的交友圈及開闊自己的視野。這點(diǎn)以女生為重。在大學(xué)里,每個(gè)人的交友圈還是比較小的,(以我們學(xué)院為例)僅僅局限在班,系。且在女生多的學(xué)校里,女生希望通過兼職,接觸社會(huì)結(jié)交多一些的異性,以此來擴(kuò)開自己的社會(huì)視野。當(dāng)然,男生也愿意通過兼職結(jié)交更多社會(huì)的人士,為以后實(shí)習(xí)畢業(yè)提供更多的選擇。
第四,大學(xué)生愿意去兼職的目的除了鍛煉自己以外,更多的是希望通過自己的努力賺取生活費(fèi)或者零用錢。隨著年齡的長大,每個(gè)人在各方面的花消會(huì)有所增加。雖然大學(xué)生應(yīng)當(dāng)過純樸簡單的生活,但由于出門在外一些額外的花消也會(huì)有,尤其是男生。男生喜歡三兩朋友結(jié)伴聚餐,往往男生會(huì)輪流著請(qǐng)客;如果男生要購置更好的電腦設(shè)備,或者有女朋友的,花消就會(huì)更多。女生也會(huì)把錢花在裝扮的上面。一方面花消大,一方面不愿意和家里伸手要求更多的生活費(fèi),因此就選擇去兼職賺取些零用錢。
對(duì)于兼職是否會(huì)影響學(xué)業(yè),6%的學(xué)生表示一定會(huì),6%的學(xué)生表示一定不會(huì),12%的學(xué)生表示說不清楚,有76%的學(xué)生認(rèn)為兼職可能會(huì)影響學(xué)業(yè),這要依靠個(gè)人自身情況而定??梢姶蠖鄶?shù)同學(xué)認(rèn)為要想使兼職與學(xué)習(xí)兩不誤,就要合理分配自己的時(shí)間,依據(jù)自身情況來確定是否做兼職。
對(duì)于兼職與上課時(shí)間相沖突時(shí)學(xué)生的做法這個(gè)問題,有60%的同學(xué)選擇上課,但有38%的同學(xué)選擇視情況而定,2%的同學(xué)選擇其他??梢姶蠖鄶?shù)同學(xué)能夠正確處理學(xué)業(yè)與兼職的問題,認(rèn)為大學(xué)里學(xué)習(xí)最重要,其他的東西都是次要的。選擇視情況而定的同學(xué)主要是因?yàn)橄铝羞@些原因:
①與兼職沖突的課程枯燥乏味,難以提起學(xué)習(xí)興趣,不如逃課去做兼職。
②沖突課程由于輔導(dǎo)員或任課教師經(jīng)常點(diǎn)名,而不得不選擇上課。
③沖突課程是專業(yè)課,比較重要 ,不能逃課去做兼職。
5合作也增強(qiáng)了我們的團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力。
就調(diào)查過程中發(fā)現(xiàn)的問題,我們提出以下建議:
1.學(xué)生應(yīng)正確處理兼職與學(xué)業(yè)的關(guān)系,學(xué)校應(yīng)對(duì)學(xué)生進(jìn)行教育,我們不反對(duì)兼職,但學(xué)生應(yīng)分清主次,提高思想認(rèn)識(shí)。在大學(xué)里,學(xué)生還是應(yīng)該以學(xué)習(xí)為主,其他東西是次要的,即使課程再無聊也不能占用上課時(shí)間去做兼職;
關(guān)鍵詞:熱缺血 心臟移植 高鉀 供心
中圖分類號(hào):R654T256.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1672-1349(2011)05-0569-02
Heart Function and Myocardial Structure Following Heart Warm-ischemia Caused by Hyperpotassemia in Rats
Zhao Weimao,Liang Zhixing // The First Hospital,Shanxi Medical University(Taiyuan 030001)
Abstract:ObjectiveTo research the heart function and myocardial structure of non-beating heart warm ischemia caused by hyperpotassemia in rats in order to conform the warm-ischemia time limit of the donor heart.MethodsThirty-two Wistar rats were divided into 4 groups randomly:Group A (n=8,warm ischemia 2 min),group B(n=8,warm ischemia 5 min),group C (n=8,warm ischemia 10 min),group D(n=8,warm ischemia 15 min).After the warm ischemia,Langendorff Model was established.The resuscitation of the hearts was observed,and coronary flow was measured.The intra-left ventricular pressure was record and hemodynamic values were calculated.The samples of heart were observed by light microscope.ResultsThe resuscitation in group A and group B was better than that in group C and group D.The hearts in group A and B got sinus rhythms as soon as reperfusion initiated.While ventricular fibrillation (VF) was developed in all hearts in group D.Five out of eight hearts in group D had sinus rhythm 15 min to 20 min after reperfusion started,there were three VF rhythms with continuous compression in this group.There were five hearts in group C got sinus rhythms as soon as reperfusion initiated with occasionally ventricular premature beat.Two in the VF hearts in group C got sinus rhythms with compression while a heart kept VF rhythm with continuous compression.The hemodynamic index in group A,group B,group C,and group D were different significantly.There were no significant difference between group A and group B (P>0.05).The hemodynamic index in group C and group D were lower than that group A(P0.05).ConclusionWarm ischemia caused by hyperotassemia in rat heart was unfavorable for transplantation at least ten minutes.
Key words:warm ischemia;heart transplantation;hyperotassemia;donor hearts
心臟移植已成為治療終末期心臟病的有效方法,供心質(zhì)量是心臟移植能否成功的最關(guān)鍵因素之一。心臟移植中心肌保護(hù)雖然與常規(guī)的心內(nèi)直視手術(shù)大致相同,但有其特點(diǎn),包括熱缺血期:器官在未降溫時(shí)的缺血或血流中斷稱為熱缺血。從熱缺血開始持續(xù)到器官恢復(fù)正常血供(器官未經(jīng)歷低溫過程),或者從熱缺血開始到器官明顯溫度降低(即冷缺血開始)的時(shí)間間隔稱為熱缺血時(shí)間,也就是熱缺血期。冷缺血期:保存的器官在低溫時(shí)的缺血稱為冷缺血。從冷缺血開始至器官重新恢復(fù)血供的時(shí)間間隔(整個(gè)過程器官都在低溫環(huán)境中)稱為冷缺血時(shí)間。手術(shù)缺血和再灌注期[1]。供心保存的熱缺血時(shí)限仍較多爭議,但多數(shù)學(xué)者認(rèn)為不能超過10 min[2,3]。本課題通過大鼠心臟熱缺血?jiǎng)游镌囼?yàn),探討高鉀致死后可用于心臟移植的熱缺血時(shí)間限制。
1材料與方法
1.1試驗(yàn)動(dòng)物和分組同一批Wistar大鼠32只,體重250 g~300 g,雌雄不拘(由山西醫(yī)科大學(xué)生理試驗(yàn)動(dòng)物部提供),隨機(jī)分為4組,對(duì)照組、熱缺血5 min組、熱缺血10 min組、熱缺血15 min組,每組8只。各組大鼠體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。灌注液:Krebs-Henseleit(K-H)液(mmol/L):NaCl 118、KCl 4.7、KH2PO4 1.2、CaCl2 2.5、NaHCO3 25、MgSO4 1.2、葡萄糖11.1、EDTA-2Na 0.125,pH值7.4 。
1.2試驗(yàn)方法麻醉及高鉀停跳,腹腔注射1%戊巴比妥鈉40 mg/kg及肝素1 000 U/kg麻醉下,仰臥位固定,針形電極插入四肢皮下監(jiān)測心電,經(jīng)股靜脈注射10%氯化鉀溶液(1 mL/mg)于30 s內(nèi)勻速推注完畢。心電圖監(jiān)護(hù)判斷心臟停搏。氯化鉀注射完畢后開始計(jì)時(shí)熱缺血。Langendorff模型[4],根據(jù)不同組別,放置不同時(shí)間后開胸暴露心臟,快速取出心臟(距主動(dòng)脈起始部4 mm~5 mm處將主動(dòng)脈及其他血管一并剪短)立即置于預(yù)先用95%的O2及5%CO2(2.0 L/min)飽和的4 ℃K-H液中,漂洗并輕輕擠出心臟中的血液,防止血凝塊形成。主動(dòng)脈插管,置于Langendorff 灌注管口,用4號(hào)絲線結(jié)扎固定后進(jìn)行心臟逆行恒壓灌注。整個(gè)操作過程在2 min內(nèi)完成。主動(dòng)脈根部灌注37 ℃、pH7.4充以95%O2及5%CO2混合氣飽和的K-H緩沖液,灌注壓力設(shè)定80 cmH2O(1 cmH2O =0.098 kPa)灌注時(shí)間為1 h。
1.3觀察指標(biāo)復(fù)蘇情況,復(fù)灌后,觀察心臟復(fù)跳的情況。平均冠脈流量,收集復(fù)灌5 min期間的冠狀靜脈流出液測定平均冠脈流量。血流動(dòng)力學(xué),復(fù)灌30 min后,心臟表現(xiàn)穩(wěn)定時(shí),經(jīng)二尖瓣口向左室內(nèi)置入測壓球囊,經(jīng)壓力傳感器與生物信號(hào)放大器相連,調(diào)整球囊體積,將左室舒張末壓控制在1.0 kPa~2.0 kPa,描記左室壓力波形,利用計(jì)算機(jī)程序分析,得出心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室發(fā)展壓(LVDP)、左室內(nèi)壓上升支最大斜率(+dp/dtmax)、左室內(nèi)壓下降支最大斜率(-dp/dtmax),平均冠脈流量(CSF)。
組織學(xué)檢查,灌流結(jié)束后取左心室前壁中點(diǎn)相同部位切取心肌組織塊,按照電鏡要求制成50 nm~60 nm超薄切片,使用透射電觀察并攝片。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,以SPSS 13.0行數(shù)據(jù)分析,組間行t檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。
2結(jié)果
2.1復(fù)蘇情況A組和B組心臟在復(fù)灌10 min內(nèi)均自動(dòng)恢復(fù)為竇性心律,偶有室早,灌流期間心律規(guī)則。C組有5只心臟在灌注10 min內(nèi)自動(dòng)恢復(fù)竇性節(jié)律,偶有室早,另外3只初始為室顫,經(jīng)按心臟按摩后2只復(fù)律1只持續(xù)室顫至試驗(yàn)結(jié)束仍未復(fù)律。D組心臟初始心律全部為室顫,其中5只經(jīng)心臟按摩后可恢復(fù)竇性節(jié)律,但頻發(fā)室早或室顫,另外3只持續(xù)室顫,經(jīng)反復(fù)心臟按摩至試驗(yàn)結(jié)束仍未復(fù)律。
2.2血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)4組血流動(dòng)力學(xué)各項(xiàng)基礎(chǔ)值的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。隨著熱缺血時(shí)間的延長心功能逐漸下降,B組與A組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),C組、D組的血流動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ)值明顯低于A組和B組(P0.05)。詳見表1。2.3心肌超微結(jié)構(gòu)A組、B組心肌的超微結(jié)構(gòu)損傷不明顯,細(xì)胞膜完整,細(xì)胞核核仁清晰,染色質(zhì)無明顯邊聚,未見核溶解、核碎裂、核固縮等征象;C組肌漿網(wǎng)輕度擴(kuò)張,肌節(jié)清晰,僅輕微縮短,排列仍然整齊。線粒體中度腫脹,嵴多且清晰,排列整齊。D組心肌線粒體腫脹明顯,嵴數(shù)量少而小,排列紊亂,核染色質(zhì)呈團(tuán)塊狀邊聚。
3討論
心臟移植是治療各種終末期心臟病的有效方法,心臟移植的半壽期已經(jīng)達(dá)到了10年[5],但供體的不足嚴(yán)重限制了心臟移植的開展,傳統(tǒng)的心臟移植采用腦死亡的無熱缺血供心,腦死亡是一種病理生理狀態(tài),在其早期雖然常伴有血流動(dòng)力學(xué)改變,短暫的心肌缺血可導(dǎo)致心肌的組織學(xué)損傷,但仍能較安全的用于心臟移植。
Hamphrey認(rèn)為ATP的含量是衡量細(xì)胞完整性及功能恢復(fù)性的最好指標(biāo)[6,7],當(dāng)ATP降至缺血前的50%時(shí)其缺血所致的損傷是不可逆的[8],由于心臟移植不光是存在熱缺血期還存在冷缺血期以及手術(shù)缺血期。通過測定熱缺血期APT的含量,從臨床上安全起見,熱缺血時(shí)間應(yīng)在10 min之內(nèi)。
本試驗(yàn)采用注射高鉀溶液導(dǎo)致心臟停搏,熱缺血后立即進(jìn)行離體心臟復(fù)灌,在高鉀因素的影響下心臟只經(jīng)歷了熱缺血期間的損害。在熱缺血期間,由于底物不能供給、氧的缺乏、線粒體進(jìn)行無氧代謝、酸中毒抑制糖解、線粒體膜改變致脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)障礙,同時(shí)熱缺血的溫度、停搏的時(shí)間等因素,均可能導(dǎo)致心臟能量很快被消耗,從而影響心臟的功能和結(jié)構(gòu)的改變。試驗(yàn)結(jié)果顯示:鼠心在常溫下熱缺血0、5 min、10 min,心臟收縮功能、超微結(jié)構(gòu)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。隨著熱缺血時(shí)間的延長,心肌損傷略有加重。在熱缺血10 min時(shí),可見左室LVSP及LVDP出現(xiàn)一定程度的降低,但仍達(dá)第一組的80%左右,雖然有心肌纖維少量扭曲斷裂改變,但沒有細(xì)胞質(zhì)濃縮,無細(xì)胞灶性壞死,未見明顯空泡變性,損傷屬可逆性變化。熱缺血15 min時(shí)心臟收縮功能明顯下降,線粒體腫脹,核染色質(zhì)呈團(tuán)塊狀邊聚。停跳于高鉀的心臟在熱缺血5 min~10 min內(nèi),心肌組織缺血損傷隨時(shí)間延長稍有加重,但左室功能未見明顯減退,心肌損傷仍為可逆性改變。熱缺血15 min時(shí),心功能明顯減退,心肌超微結(jié)構(gòu)損傷嚴(yán)重,部分損傷已達(dá)不可逆性改變。本實(shí)驗(yàn)顯示,停跳于高鉀的心臟熱缺血10 min以上不宜用于心臟移植。
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【關(guān)鍵詞】 甲狀腺功能亢進(jìn)癥 心肌 超氧化物歧化酶 丙二醛 大鼠 Wistar
[ABSTRACT]ObjectiveTo study the antioxidation changes of cardiac muscle in rats with hyperthyroidism. Methods An animal model of rat with hyperthyroidism was established, and cardiac muscle SOD, MDA and GPX were detected by enzymology. ResultsThe content of SOD and GPX of hyperthyroidism group was significantly lower than that of the normal group (t=8.50, 4.52; P
[KEY WORDS]hyperthyroidism; myocardium; superoxide dismutase; malondialdehyde; rats, Wistar
甲狀腺功能亢進(jìn)癥(甲亢)是一種內(nèi)分泌系統(tǒng)代謝功能紊亂性疾病,可引起多器官功能損害。氧自由基(OFR)是機(jī)體的一種氧化代謝產(chǎn)物。機(jī)體依靠組織的抗氧化酶和抗氧化物來清除OFR,其抗氧化能力的高低與機(jī)體組織氧化損傷的程度和功能狀態(tài)密切相關(guān)。在某些損傷因素作用下,機(jī)體OFR生成過多,抗氧化能力下降,可導(dǎo)致某些疾病的發(fā)生和加劇。近年研究表明,由OFR引發(fā)的生物膜氧化損傷是一種新的致病因素,正引起人們的廣泛關(guān)注。本研究系統(tǒng)觀察了甲亢大鼠心肌抗氧化能力的改變,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar大鼠18只,由青島市藥檢所提供,體質(zhì)量180~200 g,雌雄各半。隨機(jī)分為對(duì)照組和甲亢組。
1.1.2 誘導(dǎo)藥物 L甲狀腺素鹽由Sigma公司生產(chǎn),批號(hào)為T25011G。
1.1.3 試劑 超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱苷肽過氧化物酶(GPX)試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。
1.2 方法
1.2.1 甲亢模型的建立 按每100 g體質(zhì)量注射300 μg L甲狀腺素鹽計(jì)算,每天甲亢組大鼠腹腔注射300 mg/L甲狀腺素[1,2]。對(duì)照組與甲亢組大鼠均飼喂普通飼料,喂養(yǎng)35 d,觀察大鼠生長發(fā)育。
1.2.2 大鼠血清中T3、T4含量的測定 甲亢模型建立35 d后,分別采集正常組和甲亢組大鼠心腔內(nèi)血液,3 000 r/min離心3 min,留取血清,以放射免疫法檢測其T3、T4含量。
1.2.3 大鼠心臟勻漿中抗氧化指標(biāo)的含量或活性測定 于甲亢模型建立35 d后,處死大鼠,取出心臟制成勻漿,用試劑盒測定其SOD、MDA和GPX的含量或活性。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示,采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
2 結(jié)
果
2.1 兩組大鼠血清T3、T4濃度的比較
甲亢組T3、T4濃度分別(1.4±0.2)、(36.6±2.2)nmol/L,對(duì)照組分別為(0.7±0.2)、(22.3±1.3)nmol/L,甲亢組與對(duì)照組比較,差異有顯著性(t=7.67、16.86,P
2.2 兩組大鼠心臟勻漿中SOD和MDA及GPX 含量或活性檢測結(jié)果 甲亢組與對(duì)照組比較,SOD活性、GPX含量明顯下降(t=8.50、4.52,P
3 討
論
甲亢疾病對(duì)心肌功能的損害主要是由于甲狀腺激素分泌增多等因素[3],使心率加快,心肌收縮力加強(qiáng),營養(yǎng)物質(zhì)和氧的消耗增加;且心肌內(nèi)氧化磷酸化或腺苷酸環(huán)化酶活性下降,使心臟中可以利用的能源如ATP等的含量不足所致[4]。此外,甲亢時(shí),機(jī)體處于一種高動(dòng)力循環(huán)狀態(tài),心臟高輸出量和心肌舒張期短又可導(dǎo)致心肌本身灌流不足,從而導(dǎo)致心肌細(xì)胞缺血、低氧。
大量研究證實(shí),心肌細(xì)胞缺血、低氧,可導(dǎo)致OFR大量生成[5]。心肌缺血時(shí),體內(nèi)生成大量的兒茶酚胺,在其自氧化過程中可生成大量有毒性的OFR。此外,心臟為一個(gè)膜性器官,膜性結(jié)構(gòu)的發(fā)達(dá)必然導(dǎo)致脂質(zhì)分子含量豐富,因而更易遭受脂質(zhì)過氧化作用損害[6]。
通常組織在正常氧化代謝中,會(huì)產(chǎn)生少量的自由基。同時(shí),細(xì)胞內(nèi)防御系統(tǒng)(自由基清除酶類和抗氧化劑)維持氧自由基的代謝平衡。OFR的過量生成,可攻擊生物膜磷脂中存在的大量多聚不飽和脂肪酸(PUFA),PUFA對(duì)各種自由基的氧化作用十分敏感,極易引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用,并由此形成脂質(zhì)過氧化物,如MDA。在有氧的條件下脂質(zhì)過氧化物不穩(wěn)定,能分解生成一系列復(fù)雜產(chǎn)物,如醛基、酮基、羥基、羰基等,可把活性氧轉(zhuǎn)化成活性化學(xué)劑,放大活性氧的作用。這些分解產(chǎn)物,一些是無害的,另一些則能引起細(xì)胞代謝和功能障礙,甚至死亡。
轉(zhuǎn)貼于
機(jī)體中的抗氧化酶主要有SOD以及各種過氧化物酶,如GPX、過氧化氫酶(CAT)和其他血紅蛋白過氧化物酶等??寡趸冈谏锵到y(tǒng)中,在防止氧代謝的損傷中具有重要作用。其中,GPX可使組織中過氧化氫得以清除,使脂質(zhì)過氧化物轉(zhuǎn)化為無毒的羥基化合物,使細(xì)胞免遭過氧化物的損傷和干擾。而SOD能阻斷毒性更強(qiáng)的羥自由基的產(chǎn)生,其含量變化可反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度,間接地反映細(xì)胞受損程度[7]。
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,甲亢組大鼠血清T3、T4含量較對(duì)照組高,且出現(xiàn)體質(zhì)量下降、體溫升高、飲食增多等表現(xiàn),提示甲亢模型建立成功。甲亢大鼠心肌細(xì)胞中SOD、GPX活性較正常大鼠明顯下降,MDA含量則明顯升高。其機(jī)制可能是,甲亢引起心肌細(xì)胞缺血、低氧,導(dǎo)致兒茶酚胺等物質(zhì)含量增多,在其代謝過程中,生成大量有毒性的自由基,從而加重了對(duì)心肌細(xì)胞的損害。
綜上所述,甲亢大鼠心肌抗氧化能力明顯下降。這對(duì)于利用藥物從抗氧化方面治療甲亢的心肌損害,提高心肌抗氧化能力,以及研究其作用機(jī)制等提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
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