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基因多態(tài)性分析的意義范文第1篇

【摘要】 目的 探討亞甲基四氫葉酸還原酶基因(MTHFR)C677T多態(tài)與上海地區(qū)漢族人群骨質(zhì)疏松性骨折遺傳易感性的關(guān)系。方法 采用TaqMan方法檢測(cè)205例骨質(zhì)疏松性骨折患者(骨折組)與205例健康人群(對(duì)照組)MTHFR C677T的基因型分布及差異。結(jié)果 骨折組中的T等位基因頻率為43.7%，顯著高于對(duì)照組(36.1%，P=0.027)，提示T是骨折發(fā)生的危險(xiǎn)因素(OR=1.37，95% CI=1.04～1.82)。與CC基因型相比，CT基因型和TT基因型攜帶者的骨折發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)分別增加至1.48倍(95% CI=0.95～2.31，P=0.083)和2.11倍(95% CI=1.15～3.89，P=0.017)。將CC、CT和TT視為不同的等級(jí)，存在等位基因劑量反應(yīng)關(guān)系(P=0.027)。結(jié)論 T增加骨折發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，并呈等位基因劑量反應(yīng)關(guān)系，TT基因型是上海地區(qū)漢族人群發(fā)生骨質(zhì)疏松性骨折的遺傳易感因素。

【關(guān)鍵詞】 骨質(zhì)疏松性骨折;疾病遺傳易感性;基因，亞甲基四氫葉酸還原酶;基因多態(tài)

近年來(lái)遺傳因素對(duì)骨質(zhì)疏松性骨折發(fā)病的影響逐步受到重視。現(xiàn)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)多種與其發(fā)病相關(guān)的基因，如維生素D受體、雌激素受體、I型膠原蛋白等〔1～3〕。亞甲基四氫葉酸還原酶基因(MTHFR)是另一重要的影響骨質(zhì)疏松性骨折發(fā)病的候選基因，其編碼蛋白與同型半胱氨酸代謝密切相關(guān)，而高水平的血清同型半胱氨酸被證實(shí)參與骨質(zhì)疏松性骨折的病理發(fā)生〔4，5〕。MTHFR基因在人群中具有多態(tài)性，其中以位于催化區(qū)的C677T最為常見(jiàn)，導(dǎo)致酶活性、熱穩(wěn)定性下降和血清同型半胱氨酸水平增加。已有研究顯示，MTHFR C677T是歐洲丹麥人群發(fā)生骨質(zhì)疏松性骨折的遺傳易感因素〔6～8〕。但對(duì)我國(guó)香港人群的研究結(jié)果則顯示，MTHFR C677T與骨質(zhì)疏松性骨折發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)關(guān)〔9〕。本研究旨在探討我國(guó)上海地區(qū)漢族人群中MTHFR C677T多態(tài)性與骨質(zhì)疏松性骨折的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 對(duì)象 從門診及住院病人中隨機(jī)抽取確診為骨質(zhì)疏松性骨折的上海籍漢族患者205例，男58例，女147例，年齡52～83歲，平均(66.3±7.2)歲。其中椎體骨折89例，髖部骨折116例。骨質(zhì)疏松診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)WHO規(guī)定(骨密度低于同性別骨峰值的-2.5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差)。對(duì)照組為門診體檢的上海籍漢族健康人群205例，男57例，女148例，年齡51～83歲，平均(66.6±7.2)歲。入選標(biāo)準(zhǔn)為骨密度大于同性別骨峰值的-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差。兩組性別、年齡方面保持均衡，具有可比性。對(duì)全部對(duì)象行腰椎(L2～L4)及髖部(髖部骨折患者檢測(cè)健側(cè))骨密度檢查，排除影響骨代謝的疾病(代謝性、廢用性及某些藥物、營(yíng)養(yǎng)不良等所致骨病;骨腫瘤;特發(fā)性骨質(zhì)疏松等)或曾服用影響骨代謝的藥物者。

1.2 方法 按常規(guī)蛋白酶K、酚/氯仿法提取外周血白細(xì)胞基因組DNA，MTHFR基因C677T多態(tài)基因型分析采用TaqMan方法，引物和探針的設(shè)計(jì)用Primer Express軟件(Applied Biosystems，F(xiàn)oster City，CA)完成。引物和探針的序列如下：上游引物：5′AGGCTGACCTGAAGCACTTGAA3′;下游引物：5′CTCAAAGAAAGCTGCGTGATGA3′;等位基因C特異性TaqMan 探針：5′FAMTGTCTGCGGGAGCCGATTTCAMGB3′;等位基因T特異性TaqMan探針：5′TETAGGTGTCTGCGGGAGTCGATTT

CAMGB3′;擴(kuò)增片段長(zhǎng)度74 bp。PCR擴(kuò)增體系(25 μl)中含:1× TaqMan PCR master mix (Applied Biosystems，F(xiàn)oster City，CA)，1 μl(50 ng/μl)基因組DNA，1 μmol/L上游、下游引物，0.2 μmol/L FAM標(biāo)記探針，0.2 μmol/L TET標(biāo)記探針。擴(kuò)增參數(shù)：50℃ 預(yù)熱2 min，95℃ 預(yù)變性10 min，然后95℃ 變性15 s，62℃ 復(fù)性1 min，共40個(gè)循環(huán)，最后在ABI 7700上檢測(cè)熒光信號(hào)。基因型分析用Sequence Detector System 2.0 軟件(Applied Biosystems，F(xiàn)oster City，CA)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 以非條件Logistic回歸法計(jì)算表示相對(duì)危險(xiǎn)度的比值比(OR)及其95%可信區(qū)間(CI)。OR值均經(jīng)性別、年齡、吸煙和體重指數(shù)(BMI，kg/m2)校正。采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)分析系統(tǒng)。HardyWeinberg遺傳平衡和趨勢(shì)檢驗(yàn)在Internet上進(jìn)行(ihg.gsf.de/ihg/snps.html)。

2 結(jié) 果

見(jiàn)表1。較大體重指數(shù)者(>24.0)在骨折組和對(duì)照組中分別占29.3%和50.7%(P

對(duì)照組MTHFR C677T基因型頻率：CC 41.0%、CT 45.9%和TT 13.2%，符合HardyWeinberg遺傳平衡定律(P=0.931)，而骨折組的基因型頻率：CC 31.2%、CT 50.2%和TT 18.5%。骨折組中T等位基因頻率為43.7%，對(duì)照組為36.1%，T的骨折發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)是C的1.37倍(95% CI=1.04～1.82，P=0.027)。與CC純合子比較，CT雜合子的骨折風(fēng)險(xiǎn)增加至1.48倍(95% CI=0.95～2.31，P=0.083)，而TT純合子的骨折風(fēng)險(xiǎn)顯著增加至2.11倍(95% CI=1.15～3.89，P=0.017)。將CT和TT基因型合并計(jì)算，則其骨折的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著增加至1.62倍(95% CI=1.06～2.46，P= 0.025)。若將CC、CT和TT視為不同的等級(jí)，存在等位基因劑量反應(yīng)關(guān)系(P=0.027)。表1 兩組對(duì)象多種危險(xiǎn)因素頻率及其與骨質(zhì)疏松性骨折的風(fēng)險(xiǎn)〔n(%1)經(jīng)表中各危險(xiǎn)因素校正

3 討 論

MTHFR與同型半胱氨酸代謝密切相關(guān)，而高水平的血清同型半胱氨酸被證實(shí)參與骨質(zhì)疏松性骨折的病理發(fā)生〔4，5〕。MTHFR C677T多態(tài)性改變可導(dǎo)致酶活性和熱穩(wěn)定性下降，血清同型半胱氨酸水平增加。因此，該多態(tài)性可能是人群骨質(zhì)疏松性骨折的一個(gè)危險(xiǎn)因素。本研究證實(shí)，MTHFR C677T至少是我國(guó)上海地區(qū)漢族人群骨質(zhì)疏松性骨折的一個(gè)遺傳易感因素。

以往對(duì)MTHFR C677T與骨質(zhì)疏松性骨折發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系的研究主要集中于歐洲丹麥人群，Abrahamsen等〔6～8〕研究顯示，MTHFR T等位基因攜帶(CT、TT基因型)與骨質(zhì)疏松性骨折發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)，這與本研究結(jié)果一致。但Li等〔9〕以我國(guó)香港人群為對(duì)象的研究則顯示，MTHFR C677T與骨質(zhì)疏松性骨折發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)關(guān)。其不一致的原因可能香港地區(qū)正常人群中CC、CT及TT基因型頻率分別為0.62、0.33和0.05，而上海地區(qū)正常漢族人群中三種基因型頻率分別為0.41、0.46和0.13，提示人群差異可能是造成兩項(xiàng)研究結(jié)果不一致的重要原因之一。新近以我國(guó)安徽省女性人群為對(duì)象的研究顯示〔10〕，MTHFR T等位基因女性攜帶者發(fā)生骨質(zhì)疏松性骨折的風(fēng)險(xiǎn)與CC基因型相比呈顯著性增加。本研究進(jìn)一步表明，T等位基因攜帶不僅顯著增加女性發(fā)生骨質(zhì)疏松性骨折的風(fēng)險(xiǎn)，也同樣增加男性的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，MTHFR 677TT基因型至少是我國(guó)上海地區(qū)漢族人群骨質(zhì)疏松性骨折的一個(gè)遺傳易感分子，可作為骨質(zhì)疏松性骨折高危人群的篩選指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

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基因多態(tài)性分析的意義范文第2篇

【關(guān)鍵詞】 成人遲發(fā)自身免疫型糖尿??； MICA基因； 第5外顯子

中圖分類號(hào) R587.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2014）16-0036-02

隨著社會(huì)與經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，糖尿病患者數(shù)量在迅速增多，對(duì)糖尿病的研究也逐漸深入。目前糖尿病主要分為1型糖尿?。═1DM）和2型糖尿病（T2DM），其中成人遲發(fā)自身免疫型糖尿?。↙ADA）屬于緩慢進(jìn)展性1型免疫介導(dǎo)性糖尿病中一個(gè)亞型，因其發(fā)病時(shí)間較晚主要存在于成人中而得名，在糖尿病患者群體中約占有12%[1]。該病慢性進(jìn)展為T1DM是受到觸發(fā)因素的影響還是由于遺傳背景原因一直是臨床爭(zhēng)論的焦點(diǎn)，因此對(duì)于MICA基因中第5外顯子多態(tài)性與LADA發(fā)病的關(guān)系也成為了對(duì)該病的一個(gè)主要研究方向[2]。本文對(duì)筆者所在醫(yī)院LADA患者、T2DM患者以及正常體檢者的MICA外顯子5多態(tài)性進(jìn)行對(duì)比觀察，以分析其與LADA發(fā)病之間的相關(guān)性，作為臨床參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年5月-2013年8月收治的LADA患者33例（LADA組），其中男17例、女16例，平均年齡（39.82±7.14）歲；另選取同期收治2型糖尿病患者35例（T2DM組），其中男19例、女16例，平均年齡（38.75±8.36）歲；以及正常體檢者40例（NC組），其中男21例、女19例，平均年齡（37.42±11.25）歲。三組年齡、性別等一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。LADA組入選標(biāo)準(zhǔn)，年齡超過(guò)25歲，有明顯“三多一少”等糖尿病臨床癥狀，起病后6個(gè)月可不依賴胰島素治療且未出現(xiàn)酮癥，胰島自身抗體呈陽(yáng)性[3]。

1.2 方法

所有入選研究對(duì)象均實(shí)施同樣的聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（PCR-RFLP）技術(shù)及PAGE銀染技術(shù)隊(duì)MICA第5外顯子多態(tài)性進(jìn)行觀察，具體步驟如下：首先制備基因組DNA，通過(guò)DNA試劑盒對(duì)全血基因組DNA進(jìn)行提取，并使用無(wú)水乙醇進(jìn)行DNA沉淀。而后實(shí)施PCR擴(kuò)增，所應(yīng)用上游引物序列為5’-CCT TTT TTT CAG GGA AAG TGC-3’，下游引物序列為5’-CCT TAC CAT CTC CAG AAACTG C-3’；反應(yīng)體系為50μl，其中包括基因組DNA（0.3 μg/μl）含量為5 μl，其上下游引物（10 pmol/L）含量為各5 μl，MgCl2（25 mmol/L）含量為2.5 μl，Taq酶（5 U/μl）含量為0.5 μl，dNTPs（2 mmol/L）含量為1 μl，以及10*buffer緩沖液5 μl和ddH2O 26 μl；設(shè)定以下反應(yīng)條件，在94 ℃環(huán)境下進(jìn)行5 min預(yù)變性及45 s變性，而后通過(guò)57℃退火及72 ℃延伸各30 s為一個(gè)循環(huán)，經(jīng)過(guò)30個(gè)循環(huán)后，進(jìn)行5 min的72 ℃延伸，而后保存在4 ℃環(huán)境下[4]。擴(kuò)增后使用2%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳并使用溴化乙錠進(jìn)行染色，通過(guò)紫外燈照射觀察。

1.3 觀察指標(biāo)

與NC組相對(duì)比，觀察LADA組及T2DM組MICA基因外顯子5的5種等位基因（A4、A5、A5.1、A6、A9）頻率分布情況，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)對(duì)比分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 15.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用字2檢驗(yàn)，P

2 結(jié)果

LADA組患者M(jìn)ICA第5外顯子中A5.1等位基因的頻率相比NC組明顯增高，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；T2DM組患者M(jìn)ICA第5外顯子等位基因多態(tài)性分布與NC組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。詳見(jiàn)表1。

3 討論

隨著我國(guó)社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展與居民生活水平提高、飲食結(jié)構(gòu)改變等，糖尿病已經(jīng)成為對(duì)我國(guó)居民健康、生命造成嚴(yán)重影響的重點(diǎn)疾病之一，給患者的家庭與社會(huì)均造成了極大的負(fù)擔(dān)[5]。而隨著對(duì)糖尿病研究的進(jìn)一步深入，不同類型糖尿病之間差異以及診治特點(diǎn)成為有效治療糖尿病患者的重要前提。

LADA屬于1型糖尿病中的緩慢進(jìn)展型，也具有自身免疫破壞的特點(diǎn)，但該病發(fā)病初期與T2DM具有較為相近的臨床表現(xiàn)，在臨床上進(jìn)行初診時(shí)常會(huì)因臨床特征而被誤診為T2DM。如按照T2DM治療方法在該病早期應(yīng)用降糖藥能夠形成控制，但隨病程緩慢進(jìn)展會(huì)逐漸失效，甚至可產(chǎn)生酮癥酸中毒[6]。

該病發(fā)病機(jī)制與糖尿病患者引起自身免疫破壞機(jī)制基本相同，但其中較為特殊的是胰島β細(xì)胞的免疫破壞會(huì)呈現(xiàn)緩慢進(jìn)展性，這一機(jī)制的誘發(fā)是受到外界觸發(fā)因素的影響，還是受到遺傳因素的干擾是臨床上爭(zhēng)論的焦點(diǎn)。在1994年發(fā)現(xiàn)MIC基因家族中的MICA基因后，對(duì)其與LADA發(fā)病之間的相關(guān)性研究一直收到國(guó)內(nèi)外相關(guān)領(lǐng)域的重視。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，MICA基因包含外顯子6個(gè)、內(nèi)含子5個(gè)，而其中第5外顯子具有GCT重復(fù)序列微衛(wèi)星多態(tài)性，包含有A4、A5、A5.1、A6、A9五個(gè)等位基因[7]。通過(guò)對(duì)MICA等位基因與LADA發(fā)病過(guò)程之間關(guān)系的研究，發(fā)現(xiàn)其中等位基因A5.1與LADA發(fā)病之間存有密切的關(guān)聯(lián)，從這一角度而言為L(zhǎng)ADA受到遺傳因素誘發(fā)提供了有力的依據(jù)[8]。

因各國(guó)患者群體MICA基因多態(tài)性有所不同，因此本文作者對(duì)我國(guó)患者的MICA外顯子5多態(tài)性與LADA之間進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)LADA組患者M(jìn)ICA第5外顯子中A5.1等位基因的頻率相比NC組明顯增高，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；T2DM組患者M(jìn)ICA第5外顯子等位基因多態(tài)性分布與NC組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。由此可見(jiàn)，LADA患者的MICA基因外顯子5多態(tài)性與正常人有異，其中等位基因A5.1與LADA發(fā)病存在較密切相關(guān)性，是LADA的重要危險(xiǎn)因素。

參考文獻(xiàn)

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[7]王競(jìng).成人隱匿性自身免疫性糖尿?。↙ADA）臨床特征及其與CTLA-4基因多態(tài)性關(guān)系的病例對(duì)照研究[D].天津：天津醫(yī)科大學(xué)，2008.

基因多態(tài)性分析的意義范文第3篇

【關(guān)鍵詞】IL-8；齲；牙周炎

【中圖分類號(hào)】R78 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004-7484（2013）01-0115-01

齲病是一種危害人類健康的常見(jiàn)口腔疾患。細(xì)菌及其毒素極易侵襲至牙髓，從而激發(fā)牙髓的免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生多種細(xì)胞因子。IL-8是重要的促炎因子和免疫調(diào)節(jié)因子，在齲病性牙周炎的發(fā)病機(jī)制中具有重要作用[1]　。本文檢測(cè)正常、不同齲病齦溝液中IL-8，并進(jìn)行基因多態(tài)性分析。了解IL-8在不同牙周狀態(tài)下含量的變化及其在齲源性牙周炎發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的意義。

1　資料和方法

1.1　病例選擇：所選我院就診患者。選擇因修復(fù)等原因拔除的30　顆無(wú)齲損和充填體、無(wú)牙髓疼痛史的完整牙齒為對(duì)照組。選擇臨床診斷為不同齲齒的患牙各30顆。

1.2　標(biāo)本的收集和檢測(cè)：去除受試牙面的齦上菌斑、牙石，將吸潮紙尖分別插入每顆受試牙的頰、舌面的近中和遠(yuǎn)中4個(gè)位點(diǎn)。將取完后的四根吸潮紙尖一同放回原EP管中再次稱重，減去原記錄重量，即為所測(cè)齦溝液重量。用雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測(cè)牙髓組織中IL-8含量。所有研究對(duì)象都是漢族，用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析檢測(cè)病例組和對(duì)照組的IL-8基因-251位點(diǎn)的基因型分布，IL-8基因251位點(diǎn)有3種基因型，TT純合子、AT雜合子、AA純合子。

1.3　統(tǒng)計(jì)分析：　采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)結(jié)果進(jìn)行秩和檢驗(yàn)。

2　結(jié)果

2.1 齲病及牙周炎程度與IL-8含量關(guān)系

所有齦溝液及牙髓標(biāo)本均檢出了IL-8，不同個(gè)體IL-8含量差異較大。IL-8含量在深齲、重度牙周炎中最高，分別與正常牙齒牙髓組分別對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

齦溝液中IL-8濃度（ng/L）

2.2　齲病牙周炎程度與IL-8基因多態(tài)性分析

分析酶切產(chǎn)物，IL-8基因-251位點(diǎn)有3種基因型：TT、AT、AA。如圖所示，如為TT純合子，則l條DN段長(zhǎng)度為106bp，AT雜合子3條DN段長(zhǎng)度分別為106，75，31bp，AA純合子2條DN段長(zhǎng)度為75和31bp。

3　討論

齲病的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)由變鏈菌、粘性放線菌和乳桿菌等參與的感染性慢性進(jìn)行性牙體硬組織的破壞過(guò)程[2]　。細(xì)胞因子（CK）　的深入研究使人們對(duì)炎癥的認(rèn)識(shí)有了突破性的進(jìn)展。在對(duì)炎癥的認(rèn)識(shí)過(guò)程中，已從傳統(tǒng)的炎性介質(zhì)深入到CK　途徑[3]　，　IL-8是誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞反應(yīng)中的最初介質(zhì)，具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，可活化各種炎細(xì)胞，減低血管張力，增加血管通透性。從試驗(yàn)結(jié)果看，牙髓組織中均存在IL-8，其含量可反應(yīng)齲病進(jìn)展過(guò)程中的牙髓健康狀態(tài)及其免疫防御功能，它是反應(yīng)齲病牙髓狀態(tài)的重要細(xì)胞因子。在齲病牙髓炎中TA、AA基因型出現(xiàn)頻率的差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明在遺傳背景下攜帶TA、AA基因型者發(fā)生齲病的風(fēng)險(xiǎn)可能增加，IL-8基因-251位點(diǎn)AA及TA基因型可能是漢族人群齲病的易感基因型。研究齲病現(xiàn)狀、病因及病變程度中細(xì)胞因子的變化及其與齲病病變程度的關(guān)系，為臨床防治及判斷預(yù)后有重要的意義。

參考文獻(xiàn)：

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基因多態(tài)性分析的意義范文第4篇

【摘要】 目的： 探討klotho基因c?1818t多態(tài)性與中國(guó)蘇皖地區(qū)漢族人群不穩(wěn)定性心絞痛（unstable angina pectoris, uap）的可能關(guān)系。方法： 應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（pcr）及基因芯片（gene microarray）方法，檢測(cè)146例uap患者和235例非冠心病者的klotho基因c?1818t多態(tài)性。結(jié)果： 與對(duì)照組相比：(1)uap患者cc，ct和tt基因型以及t等位基因型頻率分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p值均＞0.05）；(2)年齡<60歲的uap組tt基因型頻率和女性u(píng)ap組tt基因型，t等位基因頻率均明顯升高（p值分別為0.017，0.049，0.026）。在調(diào)整相關(guān)危險(xiǎn)因素并經(jīng)多元logistic回歸分析后，tt基因型與女性u(píng)ap的發(fā)生存在相關(guān)性（p=0.041），而t等位基因與女性u(píng)ap的發(fā)生無(wú)明顯關(guān)聯(lián)（p=0.472）。結(jié)論： 在中國(guó)蘇皖地區(qū)漢族人群中，klotho基因c?1818t多態(tài)性tt基因型與女性u(píng)ap的發(fā)病存在相關(guān)性。

【關(guān)鍵詞】 klotho；基因多態(tài)性；不穩(wěn)定性心絞痛

［abstract］ objective: to investigate the possible association between the klotho gene c?1818t polymorphism and unstable angina pectoris (uap)in a chinese han population of suwan region. methods： this study was conducted with a case?control design including 146 patients with uap and 235 control subjects who were free from coronary artery disease. the klotho gene polymorphism was determined by polymerase chain reaction and gene microarray. results： compared with the control group, (1)the frequencies of cc，ct，tt genotype and the t allele of the c?1818t in uap group was not significantly different; (2)the prevalence of the tt genetype was obveriously higher in younger (age＜60)patients (p=0.017), the frequencies of tt genetype and t allele were also higher in female (p value was 0.049 and 0.026 respectively). furthermore, after adjustment for conventional risk factors by multiple logistic regression analysis showed that the tt genotype was a significant risk factor for uap in the female carrier (p=0.041), but the t allele had no association with uap in female (p=0.472). conclusion： the tt genetype of klotho gene c?1818t polymorphism was associated with the susceptibility to uap in the female among the chinese han population of suwan region.

［key words］ klotho; genetic polymorphism; unstable angina pectoris

內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡及更替在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成中起著關(guān)鍵的作用［1,2］。kuro?o等［3］發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化是klotho基因缺陷鼠的一種表型，對(duì)klotho蛋白的研究［4-9］認(rèn)為它可通過(guò)上調(diào)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ace）、調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞釋放血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、no等產(chǎn)物及改善血管應(yīng)激、影響血管緊張度和血栓形成達(dá)到抗粥樣硬化作用，從而保護(hù)心血管系統(tǒng)。以上研究表明klotho基因與動(dòng)脈粥樣硬化存在著重要的聯(lián)系。雖然目前所知與動(dòng)脈粥樣硬化形成相關(guān)的基因已有400個(gè)左右，但對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化候選基因進(jìn)行的一系列大規(guī)?；A(chǔ)研究尚未獲得預(yù)期結(jié)果［10,11］。本研究旨在探討中國(guó)蘇皖地區(qū)漢族人群klotho基因c?1818t多態(tài)性分布及其與不穩(wěn)定型心絞痛（unstable angina pectoris，uap）的相關(guān)性。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

入選病例均選自2003年11月～2007年2月在江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院、江蘇省人民醫(yī)院住院患者。選擇uap患者（uap組）146例，男117例，女29例，年齡41～84（平均65.82±9.47）歲，均符合2002年aha/acc關(guān)于uap診斷指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)照組為經(jīng)相關(guān)檢查排除冠心病者235例，其中男138例，女97例，年齡36～84（平均61.58±10.93）歲，大部分經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影證實(shí)冠狀動(dòng)脈主支無(wú)狹窄或狹窄直徑小于50%。所有研究對(duì)象均為中國(guó)蘇皖地區(qū)漢族人。

1.2 方法

1.2.1 聚合酶鏈反應(yīng)（pcr） 酚?氯仿法提取白細(xì)胞基因組dna。由takara公司合成引物，上游引物：5′?gaatgtttacctgtgggatg?3′，下游引物：5′?丙烯酰胺?tgtggttcacctgggact ?3′，預(yù)計(jì)pcr擴(kuò)增產(chǎn)物片段長(zhǎng)度為209 bp。反應(yīng)體系：10×緩沖液5 μl，mg2+終濃度為2.0 mmol/l，4種dntp終濃度為0.2 mmol/l，上下游引物各5 pmol，taq dna酶1.25 u（takara），模板dna 100 ng。反應(yīng)條件：94℃ 5 min，然后94℃ 48 s，58℃ 40 s，72℃ 55 s進(jìn)行37個(gè)循環(huán)，72℃延伸5 min。取pcr產(chǎn)物5 μl采用瓊脂糖凝膠-溴化乙啶法進(jìn)行電泳（圖1），uvi自動(dòng)凝膠成像分析系統(tǒng)觀察并結(jié)合dna分子量標(biāo)準(zhǔn)及測(cè)序方法（大連寶生物公司）判斷是否為預(yù)期的目的片段。

m: dl?2000 標(biāo)準(zhǔn)參照物 (takara)；1～8: pcr產(chǎn)物電泳條帶

圖1 klotho基因c?1818t多態(tài)性pcr產(chǎn)物電泳圖（略）

fig 1 electrophoretic image of pcr protector klotho　gene c?1818t polymorphism

1.2.2 基因芯片制備 冰異丙醇沉淀pcr產(chǎn)物，12 000 r/m離心45 min后37℃烘干備用，同時(shí)制備玻片（sigma公司）；取上述純化產(chǎn)物，加18 μl點(diǎn)樣液溶解，0℃保存20 min；將上述混合液置于384微孔板中，放入smartarrayer?48（晶芯，博奧生物公司）點(diǎn)樣儀并在玻片上完成全部點(diǎn)樣；點(diǎn)樣后，玻片在temed中真空干燥1 h，然后按序置于0.1×naoh緩沖液變性10 min，1×tbe緩沖液電泳10 min；取等量5′?cy3? atgcacgttacacatt, 5′?cy5?aaatgcatgttacacatt單核苷酸探針，與雜交液1:3稀釋后，在37 ℃下與點(diǎn)有樣品的玻片雜交3 h后置于冰冷的1×tbe緩沖液中電泳10 min。

1.2.3 基因型判斷 用capitalbiotm掃描儀（晶芯，博奧生物公司）對(duì)雜交后的玻片進(jìn)行掃描，并根據(jù)cy5/cy3比值判斷基因型（圖2）。

1.2.4 生化指標(biāo)測(cè)定 采用全自動(dòng)生化分析儀（奧林巴斯公司）測(cè)定三酰甘油（tg）、低密度脂蛋白（ldl）、高密度脂蛋白（hdl）和血糖（glu）等指標(biāo)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

計(jì)量資料結(jié)果以±s表示，采用t檢驗(yàn)，研究對(duì)象組間基因型及等位基因頻率比較采用χ2檢驗(yàn)，應(yīng)用多元logistic回歸分析基因型與uap的相關(guān)性，關(guān)聯(lián)程度用優(yōu)勢(shì)比（odds ratio, or）和95%可信區(qū)間（confidence interval, ci）表示。所有資料均采用spss 13.0軟件進(jìn)行分析，p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 uap組與對(duì)照組臨床資料分析

兩研究組收縮壓（sbp），舒張壓（dbp），glu，tg，ldl水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；uap組年齡、男性性別比及吸煙比例明顯高于對(duì)照組，而hdl水平明顯低于對(duì)照組（表1）。

表1 兩組基本資料比較（略）

tab 1 baseline characteristics in two groups

2.2 klotho基因型分析及dna序列測(cè)定

第四外顯子c?1818t多態(tài)性pcr擴(kuò)增產(chǎn)物為209 bp的片段（圖1），采用基因芯片方法判斷基因型，本研究檢測(cè)到3種基因型：紅色為tt基因型；黃色為ct基因型；綠色為cc基因型（圖2）。并抽取部分pcr產(chǎn)物經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證其基因型（圖3）。

2.3 klotho基因多態(tài)性分布

與對(duì)照組相比：(1)uap組cc，ct，tt基因型及t等位基因頻率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表2，p>0.05）；(2)亞組分析：女性u(píng)ap患者的tt基因型（p=0.049）及t等位基因（p=0.026）頻率、非老年（＜60歲）uap患者tt基因型頻率（p=0.017）均明顯升高（表3，4）；老年（≥60歲）、男性u(píng)ap患者cc，ct，tt基因型和t等位基因頻率與非老年uap患者cc，ct基因型和t等位基因頻率及女性cc，ct基因型頻率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表3，4）。

表2 klotho基因c?1818t多態(tài)性分布（略）

tab 2 genotype distribution and allele prevalene of klotho gene c?1818t polymorphisms

表3 不同年齡組klotho基因c?1818t多態(tài)性分布（略）

tab 3 genotype distribution and allele prevalene of klotho gene c?1818t polymorphisms in different age populations

表4 不同性別研究對(duì)象klotho基因c?1818t多態(tài)性分布（略）

tab 4 genotype distribution and allele prevalene of klotho polymorphisms in different sexual populations

2.4 klotho基因tt基因型和t等位基因與女性u(píng)ap患者的關(guān)系

在調(diào)整吸煙、年齡，sbp，dbp，glu，tg，ldl，hdl等危險(xiǎn)因素并經(jīng)logistic回歸分析后，tt基因型與女性u(píng)ap存在相關(guān)關(guān)系（p=0.047，表5），而t等位基因與女性u(píng)ap無(wú)明顯相關(guān)關(guān)系（p=0.472，表6）。

表5 klotho基因c?1818t多態(tài)性tt基因型與女性u(píng)ap患者的關(guān)系（略）

tab 5 unadjusted and adjusted odds ratios for the association between tt genotype of the　c?1818t polymorphism and cases in female

* ：為調(diào)整吸煙、年齡，sbp，dbp，glu，tg及l(fā)dl等危險(xiǎn)因素并經(jīng)logistic回歸分析的or值，95%ci及p值

表6 klotho基因多態(tài)性t等位基因與女性u(píng)ap患者的關(guān)系（略）

tab 6 unadjusted and adjusted odds ratios for the association between t allele of　the c?1818t polymorphism and cases in female

*：為調(diào)整吸煙、年齡，sbp，dbp，glu，tg及l(fā)dl等危險(xiǎn)因素并經(jīng)logistic回歸分析的or值，95%ci及p值

3 討論

klotho基因位于染色體13q12區(qū)域，全長(zhǎng)約為50 kb，由5個(gè)外顯子和4個(gè)內(nèi)含子組成。該基因編碼兩種蛋白，一種為含有1 014個(gè)氨基酸的跨膜蛋白，其膜外段含有兩個(gè)重復(fù)序列，與細(xì)菌、植物的β?葡萄糖苷酶存在20%～40 %的同源性，且含有一段lys?lys?arg?lys的堿性氨基酸序列，該處可被裂解,釋放出小片段肽鏈進(jìn)入體液循環(huán)發(fā)揮作用［12］；另一種為含有549個(gè)氨基酸的分泌性蛋白。klotho基因缺陷小鼠依賴乙酰膽堿的主動(dòng)脈舒張功能較野生型明顯下降，其內(nèi)皮源性no較野生型生成減少［5，13］。在運(yùn)用腺病毒將klotho基因轉(zhuǎn)入具有多種動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素的大鼠后，可以增加內(nèi)皮細(xì)胞no合成，且具有減輕動(dòng)脈粥樣硬化的作用［13］。kuwahara等［6］的研究發(fā)現(xiàn)klotho基因具有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用，在抗氧化亞氮合酶（nos）抑制劑處理后，粥樣硬化的進(jìn)程減慢。研究發(fā)現(xiàn)［4］klotho基因缺失的老鼠血漿中1型纖溶酶原激活物抑制劑（pai?1）明顯增高。pai?1的表達(dá)增加，引起血栓形成的幾率也隨之增加，這預(yù)示著klotho基因與血栓的形成存在密切聯(lián)系。

klotho基因第四外顯子c?1818t多態(tài)性t等位基因頻率在韓國(guó)冠心?。╟ad）人群中為0.172［14］，本研究發(fā)現(xiàn)，冠心病中的uap患者為0.178（表2），兩組結(jié)果相近。由此提示，在兩國(guó)冠心病或uap人群中，t等位基因出現(xiàn)的頻率相似。另外，rhee等［14］研究發(fā)現(xiàn)，t等位基因（包括ct，tt基因型）攜帶者冠心病患病率（47.1%)較cc基因型攜帶者（60.6%)低(p=0.036），特別是小于60歲的t等位基因（包括ct，tt基因型）攜帶者較cc基因型攜帶者的冠心病患病率低（p=0.025），他們認(rèn)為c?1818t多態(tài)性cc基因型可能是早發(fā)冠心病的易感基因型。本研究發(fā)現(xiàn)，女性u(píng)ap患者的tt基因型（p=0.049）及t等位基因（p=0.026）頻率、非老年（＜60歲）uap患者tt基因型頻率（p=0.017）均明顯升高（表3，4）。經(jīng)logistic回歸分析后顯示tt基因型與女性u(píng)ap的發(fā)生存在相關(guān)性（表5）。由于在年齡<60歲的對(duì)照組中并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)tt基因型，所以tt基因型是否與年齡<60歲的uap存在相關(guān)性，尚不能定論。

綜上所述，本研究結(jié)果提示，在中國(guó)蘇皖地區(qū)漢族人群中，klotho基因c?1818t多態(tài)性tt基因型與女性u(píng)ap的易感性有關(guān)，不管是否存在uap發(fā)病的其他危險(xiǎn)因素，攜帶該基因型的女性有發(fā)生uap的潛在性；攜帶t等位基因的女性有發(fā)生uap的傾向，但只有同時(shí)存在uap發(fā)病的其他危險(xiǎn)因素時(shí)才有發(fā)病的可能性。klotho基因廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，決定了它不僅在調(diào)控衰老的過(guò)程中有著重要地位，而且與眾多疾病，特別是冠心病及其特殊類型uap的發(fā)病有著密切聯(lián)系。我們對(duì)klotho基因多態(tài)性與uap相關(guān)性的研究結(jié)果在國(guó)內(nèi)外屬首次報(bào)道，為uap患者的基因?qū)W研究和一級(jí)康復(fù)干預(yù)補(bǔ)充了實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)，為進(jìn)一步闡明uap發(fā)生的遺傳背景和機(jī)制提供了一些線索，進(jìn)一步補(bǔ)充了冠狀動(dòng)脈疾病基因klotho單核苷酸多態(tài)性的數(shù)據(jù)庫(kù)信息。當(dāng)然，klotho基因第四外顯子c?1818t多態(tài)性與uap的確切關(guān)系及具體機(jī)制還有待于深入研究。

近年來(lái)，有研究推測(cè)一些基因變異可以用來(lái)預(yù)測(cè)cad/acs，但所得結(jié)果很多不能夠被重復(fù)。本研究與國(guó)外研究所得出的結(jié)論也不盡相同，分析其原因，首先，最大可能與被研究人群的地區(qū)和種族差異以及冠心病的類型不同有關(guān)。其次，研究對(duì)象不完全一致，比如，本研究對(duì)象為冠心病中的uap，而不是所有類型冠心病患者；再者，配對(duì)設(shè)計(jì)的方法不同和樣本量偏小等原因也會(huì)引起研究結(jié)果的不一致。而且klotho基因變異對(duì)cad/uap的作用可能與環(huán)境因素和其他基因的交互作用有關(guān)。所以，雖然有些研究揭示klotho基因所表達(dá)的蛋白在調(diào)控動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞no和pai?1的生成、血管緊張素ⅱ介導(dǎo)的血管損害以及血栓形成、斑塊破裂等方面起著重要作用，或該蛋白的代謝產(chǎn)物具有拮抗粥樣硬化作用，但klotho基因多態(tài)性使動(dòng)脈粥樣斑塊不穩(wěn)定的機(jī)制尚不清楚。

本研究的局限性：(1)樣本量相對(duì)較小，對(duì)統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生一定影響；(2)對(duì)照組部分未行冠脈造影，僅以無(wú)胸痛和心電圖正常等為排除uap的標(biāo)準(zhǔn)，其中可能有無(wú)癥狀性u(píng)ap患者；(3)對(duì)于c?1818t多態(tài)性與冠狀動(dòng)脈狹窄嚴(yán)重程度和冠狀動(dòng)脈病變范圍（支數(shù)）之間的關(guān)系未進(jìn)行研究；(4)行冠脈造影者以冠狀動(dòng)脈主支無(wú)狹窄或狹窄直徑小于50%為入選標(biāo)準(zhǔn)，而冠脈狹窄直徑<50%者將來(lái)有可能進(jìn)展為uap；(5)所入選的研究對(duì)象尚存活于世，存活偏倚不可避免，且未對(duì)c?1818t多態(tài)性與uap、患者生存率進(jìn)行隨訪。因此klotho基因c?1818t多態(tài)性與uap的確切關(guān)系以及與uap預(yù)后、生存率的關(guān)系還有待于下一步的研究。

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基因多態(tài)性分析的意義范文第5篇

[關(guān)鍵詞] 蛋白酪氨酸磷酸酶1B基因；基因多態(tài)性；IVS6+G82A；妊娠期高血壓疾病

[中圖分類號(hào)] R714 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2016）06（b）-0041-03

[Abstract] Objective To investigate the polymorphism of protein tyrosine phosphatase 1B gene in patients with hypertensive disorder complicating pregnancy and to investigate its correlation with the disease of pregnancy induced hypertension. Methods 50 cases of patients from June 2013 to December 2015 with preeclampsia， pregnancy induced hypertension， normal pregnant women and normal physical examination personnel were selected as the research object， and the IVS6+G82A gene polymorphism of 1B gene was sequenced. Results Preeclampsia and gestational hypertension GG genotype（40.00%， 26.00%） and the G allele （62.00%， 46.00%） was significantly higher than in normal pregnancy （16.00%， 40.00%） as well as normal medical personnel [to the specific data] （14.00%， 38.00%）， P

[Key words] Protein tyrosine phosphatase 1B gene； Gene polymorphism； IVS6+G82A； Pregnancy induced hypertension

妊娠期高血壓疾病是產(chǎn)科常見(jiàn)妊娠并發(fā)癥，其誘發(fā)病因復(fù)雜繁多[1]。相關(guān)研究指出，其發(fā)生具有一定遺傳傾向[2]。妊娠期高血壓疾病的發(fā)生嚴(yán)重影響臨床母嬰妊娠結(jié)局。近年有關(guān)蛋白酪氨酸磷酸酶1B基因與糖尿病及血脂異常等的相關(guān)研究較為廣泛，對(duì)其與高血壓的相關(guān)研究也有涉及，但其與妊娠期高血壓疾病的相關(guān)性研究甚少。該文為探討蛋白酪氨酸磷酸酶1B基因多態(tài)性與妊娠期高血壓疾病的關(guān)系，以便為臨床妊娠期高血壓疾病的預(yù)防以及治療提供可靠依據(jù)和臨床治療思路，現(xiàn)從該院隨機(jī)選取2013年6月―2015年12月期間收治入院的200例人員作為研究對(duì)象進(jìn)行蛋白酪氨酸磷酸酶1B基因的IVS6+G82A基因位點(diǎn)多態(tài)性研究，對(duì)照分析妊娠高血壓疾病患者與正常人群之間的差異，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該次研究所選研究對(duì)象為該院近年來(lái)收治入院的50例子癇前期患者、50例妊娠期高血壓患者、50例正常妊娠孕婦以及50例正常體檢人員。入選患者以及正常人員資料來(lái)源于2013年6月―2015年12月。入選均為在該院隨機(jī)數(shù)字法選取，均具有臨床代表性。50例子癇前期患者年齡在20～41歲之間，平均年齡為（27.36±4.25）歲，孕周在22～40周之間，平均孕周為（37.11±2.63）周。50例妊娠期高血壓患者年齡在23～46歲之間，平均年齡為（28.24±5.02）歲，孕周在25～40周之間，平均孕周為（38.04±3.20）周。50例正常妊娠孕婦年齡在23～44歲之間，平均年齡為（27.97±4.00）歲，孕周在26～40周之間，平均孕周為（37.52±4.58）周。50例正常體檢人員年齡在19～47歲之間，平均年齡為（28.55±7.21）歲。入選人員在年齡、孕周以及體重指數(shù)等一般資料上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），可進(jìn)行對(duì)比分析。

1.2 臨床納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

①入選患者均經(jīng)臨床確診；②入選正常人員均未合并高血壓且不存在高血壓疾病家族史；③排除存在妊娠期糖尿病等其他妊娠期合并癥的患者；④入選人員之間不存在血緣關(guān)系；⑤入選患者以及正常人員均簽署知情同意書(shū)，均為自愿參與研究[3-5]。

1.3 研究方法

入選200例人員均抽取外周靜脈的EDTA-K2抗凝血300ul備用，采用碘化鉀法提取備用外周血細(xì)胞DNA。采用紫外分光光度法測(cè)定提取DNA的濃度。用限制性片段多態(tài)性PCR（PCR-RFLP）方法對(duì)IVS6+G82A多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)。將PCR產(chǎn)物純化后限制性內(nèi)切酶Hha I進(jìn)行酶切，酶切產(chǎn)物用2%的瓊脂糖凝膠電泳30 min。僅顯示301 bp為IVS6G+82A突變純合型，顯示187 bp和114 bp為IVS6G+82A野生型，顯示301 bp、187 bp以及114 bp為IVS6G+82A突變雜合型。測(cè)序后選取三型樣本進(jìn)行正反向DNA測(cè)序進(jìn)行結(jié)果驗(yàn)證。

1.4 觀察指標(biāo)

蛋白酪氨酸磷酸酶1B基因IVS6+G82A基因位點(diǎn)多態(tài)性分布。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件統(tǒng)計(jì)分析資料；其中計(jì)量資料用（x±s）表示，并用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)；P

2 結(jié)果

蛋白酪氨酸磷酸酶1B基因IVS6+G82A基因位點(diǎn)多態(tài)性分布入選人員IVS6+G82A基因位點(diǎn)基因型以及等位基因頻率見(jiàn)表1。

3 討論

妊娠期高血壓疾病是一種嚴(yán)重威脅母嬰生命健康的妊娠期并發(fā)癥，患者可出現(xiàn)多系統(tǒng)功能的紊亂現(xiàn)象，導(dǎo)致多種不良妊娠結(jié)局的發(fā)生。據(jù)相關(guān)報(bào)道顯示[6]，妊娠期高血壓疾病在我國(guó)患病率高達(dá)9.4%，子癇前期患者占到0.9%，極大程度上降低了孕產(chǎn)婦的生育質(zhì)量。妊娠期高血壓疾病的發(fā)生受到孕產(chǎn)婦年齡、營(yíng)養(yǎng)狀況、體重指數(shù)以及精神狀態(tài)等多方面因素的復(fù)雜影響。近年來(lái)有關(guān)資料顯示[7]，各型妊娠期高血壓疾病的發(fā)生與基因位點(diǎn)突變具有一定相關(guān)性。其中鹽皮質(zhì)激素受體基因、血管緊張素原基因、降鈣素基因以及內(nèi)皮素1基因的突變均可誘發(fā)妊娠期高血壓疾病的發(fā)生。相關(guān)研究指出[8]，在肥胖相關(guān)性高血壓患者中，超質(zhì)量高血壓組患者蛋白酪氨酸磷酸酶1B基因IVS6+G82A基因位點(diǎn)GG基因型的頻率（33.89%）顯著高于單純高血壓（9.27%）、超質(zhì)量正常對(duì)照組（12.93%）以及正常對(duì)照組（18.00%），其等位基因（272）顯著高于其他3組（132、101、140）。

該文為探討妊娠期高血壓疾病患者的蛋白酪氨酸磷酸酶1B基因多態(tài)性與疾病發(fā)生的相關(guān)性，現(xiàn)從該院隨機(jī)數(shù)字法分別選取子癇前期患者、妊娠期高血壓患者、正常妊娠孕婦及正常體檢人員各50例進(jìn)行研究，子癇前期患者以及妊娠期高血壓患者的IVS6+G82A基因位點(diǎn)GG基因型（40.00%、26.00%）和G等位基因頻率（62.00%、46.00%）均顯著升高。與臨床相關(guān)高血壓與蛋白酪氨酸磷酸酶1B基因IVS6+G82A基因位點(diǎn)突變的研究存在較高的一致性。

綜上所述，G等位基因頻率的升高可在一定程度上增加妊娠期高血壓疾病患病的危險(xiǎn)性，是疾病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，妊娠早期加強(qiáng)對(duì)其篩查及早預(yù)防，可有效提升妊娠質(zhì)量。

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