前言:想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎?我們特意為您整理了5篇父親的眼睛范文,相信會(huì)為您的寫作帶來幫助,發(fā)現(xiàn)更多的寫作思路和靈感。
自從我上學(xué)以來,爸爸就總是陪在我的身旁,和我一起學(xué)習(xí)。這么多年來,我只注意到了父親昔日的青絲變成了如今的滿頭白發(fā),卻從未注意到過父親的眼睛。
一天,父親像往常一樣給我批改作業(yè)。忽然,父親抬起頭看了看時(shí)間。我第一次注意到了父親的眼睛。
乍一看,父親的眼睛和別的父親的眼睛沒有什么不同,可仔細(xì)一看,父親的眼睛中可大有學(xué)問。我們的眼睛都是黑色的,而父親的眼睛卻有些泛棕色,一架深度的近視眼鏡靜靜的橫在父親的鼻梁上。父親的眼睛中有些血絲大概是過度操勞導(dǎo)致的吧。但仍然富有生氣,兩只棕色的眼睛射出了兩道銳利光芒,很想列夫·托爾斯泰的那雙黑豹似的眼睛,像X光穿透虛偽,像長(zhǎng)劍砍破甲胄,又有一番學(xué)者的執(zhí)著,好像要把每一道題都弄懂似的,頗有陳景潤(rùn)一般的風(fēng)范。雖然父親只有四十三歲,可是他的眼角邊上已是皺紋重重。當(dāng)我問及他的眼睛為什么是棕色的時(shí)候,父親淡淡一笑,回答道:“大概是小時(shí)候營(yíng)養(yǎng)不良的緣故吧!”
在我的印象里,我的成績(jī)?cè)诎嗌线€算不錯(cuò),可是父親很少表?yè)P(yáng)過我,而是耐心的教導(dǎo)我,要我更好。他的眼睛似乎會(huì)說話,告誡我不要驕傲。成績(jī)考差的時(shí)候,父親的眼睛中流露出鼓勵(lì),讓我不要灰心喪氣,繼續(xù)加油,爭(zhēng)取在下一次的考試中名列前茅。幫我解題時(shí),父親的眼睛里有閃爍著智慧的啟迪……
【關(guān)鍵詞】高校后勤服務(wù);精細(xì)化管理;服務(wù)思路;細(xì)節(jié);人員素質(zhì)
精細(xì)化管理是指運(yùn)用精細(xì)化的手段,去實(shí)現(xiàn)組織活動(dòng)的各要素以及組織目標(biāo)的高效精確的一種管理活動(dòng)與方法,精細(xì)化管理模式在社會(huì)各領(lǐng)域中都發(fā)揮著不可替代的重要作用。高校是莘莘學(xué)子渴望成才、勤奮求學(xué)的高等學(xué)府,高校必須不斷根據(jù)最新形勢(shì)的要求調(diào)整自身的發(fā)展方向與管理策略,才能滿足知識(shí)經(jīng)濟(jì)時(shí)代到來的今天對(duì)人才培養(yǎng)的需要。作為高校重要組成部分的后勤服務(wù)工作在社會(huì)化的改革浪潮中,更是要積極探索、提升服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)現(xiàn)精細(xì)化管理,才能為高校的發(fā)展以及學(xué)生綜合素質(zhì)的提高提供更加優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。以下內(nèi)容將對(duì)如何實(shí)現(xiàn)高校后勤服務(wù)工作的精細(xì)化管理作出比較具體性的分析。
一、理清后勤服務(wù)思路,打好精細(xì)化管理基礎(chǔ)
實(shí)踐研究表明,后勤服務(wù)也就是勤管煩事、勤管瑣事,后勤服務(wù)工作的精細(xì)化管理最重要的就是從繁瑣的小事做起,不斷地理清后勤管理的相關(guān)思路。高校后勤管理部門要結(jié)合自身的實(shí)際發(fā)展情況,嚴(yán)格按照“樹立三種意識(shí)、落實(shí)五項(xiàng)要求、構(gòu)建兩支隊(duì)伍”的整體思路去開展相關(guān)工作,這其中三種意識(shí)的樹立指的是樹立為教育服務(wù)的意識(shí)、為師生的共同進(jìn)步服務(wù)的意識(shí)以及為學(xué)校管理服務(wù)的意識(shí);五項(xiàng)要求的落實(shí)指的是要加強(qiáng)學(xué)習(xí)、健全制度、把握政策、明確責(zé)任和尊重勞動(dòng);而構(gòu)建兩支隊(duì)伍指的是建設(shè)好高校后勤從業(yè)人員與管理人員隊(duì)伍。要想做到上述工作要求與服務(wù)思路,高校領(lǐng)導(dǎo)者要不斷地審時(shí)度勢(shì),總結(jié)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),通過每周召開后勤服務(wù)工作例會(huì)、后勤服務(wù)的主題性的拓展訓(xùn)練活動(dòng)、邀請(qǐng)外界專家來校指導(dǎo)以及推薦優(yōu)秀后勤管理人員外出深造等多種方式,切實(shí)加強(qiáng)對(duì)后勤管理部門的引導(dǎo)和幫助,為后勤服務(wù)工作的精細(xì)化管理的實(shí)現(xiàn)提供扎實(shí)的保障。與此同時(shí),要十分尊重后勤各工作人員的辛勤勞動(dòng)成果,在職稱評(píng)定、人才的任用選拔、福利待遇以及考核評(píng)比等方面與高校教學(xué)人員等群體平等對(duì)待,以便在更大的程度上激發(fā)和調(diào)動(dòng)后勤服務(wù)人員的工作熱情和主動(dòng)積極性,督促后勤服務(wù)工作朝著更加精細(xì)化、科學(xué)化的方向邁進(jìn)。
二、注重細(xì)節(jié),提高后勤服務(wù)工作的精細(xì)化管理水平
“細(xì)”是衡量后勤管理水平的重要標(biāo)志,作為高校發(fā)展中不可或缺的重要組成部分,高校后勤部門的相關(guān)負(fù)責(zé)人要根據(jù)最新形勢(shì)的發(fā)展要求,對(duì)各種細(xì)節(jié)性工作進(jìn)行調(diào)整與完善,以便獲得更為理想的工作實(shí)效。詳細(xì)一點(diǎn)來說,首先,要做好財(cái)產(chǎn)管理的相關(guān)工作,要根據(jù)財(cái)物并重、管用結(jié)合、分工負(fù)責(zé)的科學(xué)原則,對(duì)各項(xiàng)規(guī)章制度進(jìn)行完善,在獲得學(xué)校授權(quán)的前提下,制定諸如《學(xué)校公用物品的采購(gòu)入庫(kù)管理制度》、《后勤服務(wù)細(xì)節(jié)化標(biāo)準(zhǔn)》等,并要求所有工作嚴(yán)格按照規(guī)章制度執(zhí)行,保證各項(xiàng)服務(wù)工作的合理運(yùn)轉(zhuǎn);其次,要在食堂管理上狠下功夫,要嚴(yán)把食堂物品的采購(gòu)關(guān),將食品安全放在首要位置,在此進(jìn)程中還要開展文明用餐宣傳、制定食堂財(cái)務(wù)公開的制度以及安排專人對(duì)師生用餐進(jìn)行管理等活動(dòng),確保學(xué)校師生吃的舒心、吃的安全;再者,校園環(huán)境是學(xué)校管理的重要窗口,在綠化、凈化與美化上狠下功夫,為學(xué)校師生提供更加怡人的校園環(huán)境,比如可以考慮設(shè)立專門的衛(wèi)生監(jiān)督崗,每周對(duì)學(xué)校的教室、食堂、操場(chǎng)、學(xué)生宿舍以及廁所等各個(gè)地方進(jìn)行全面性的衛(wèi)生檢查,一旦發(fā)現(xiàn)問題就要及時(shí)予以整改,做到防患于未然。同時(shí),后勤管理部門的負(fù)責(zé)人還要經(jīng)常性的深入到師生的日常生活中去,與高校的教師、學(xué)生以及其他管理人員進(jìn)行更多的溝通和交流,引導(dǎo)他們針對(duì)后勤管理工作積極地提出自己的看法和建議,從而在集思廣益的基礎(chǔ)上為后勤服務(wù)工作的精細(xì)化管理的實(shí)現(xiàn)凝聚更多的智慧,也在拉近與學(xué)校人員距離的情況下保證后勤服務(wù)工作的針對(duì)性、合理性。
三、提高人員素質(zhì),為精細(xì)化管理提供更多優(yōu)秀人才
在知識(shí)經(jīng)濟(jì)時(shí)代到來的今天,優(yōu)秀人才在社會(huì)各行各業(yè)中的重要性不言而喻,提高后勤部門工作人員的綜合素質(zhì),是大勢(shì)所趨。首先,要注重加強(qiáng)對(duì)后期管理部門工作人員的教育和培訓(xùn)工作,在培訓(xùn)開展的進(jìn)程中,必須要講究所獲得的效果,要根據(jù)后勤管理人員的不同受教育程度、生活閱歷、年齡以及工作經(jīng)驗(yàn)等不同的因素,采取不同形式的培訓(xùn)與教育方法,確保在因人而異的培訓(xùn)體系下,培養(yǎng)出更多優(yōu)秀的管理人才;其次,要選拔任用優(yōu)秀干部,后勤管理部門的干部要具備以人為本的管理理念、要熱愛后勤管理工作、要有靈活的工作方式和先進(jìn)科學(xué)的服務(wù)理念,這就要求在選拔任用干部之時(shí),要嚴(yán)格按照選拔任用的標(biāo)準(zhǔn),實(shí)行嚴(yán)格的干部任用制度,并且加強(qiáng)對(duì)后勤管理干部的考核,考核的內(nèi)容要包括工作業(yè)績(jī)、工作態(tài)度、工作水準(zhǔn)以及團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力等,最重要的是將考核的結(jié)果與他們所獲得的福利待遇、薪酬相掛鉤,從而進(jìn)一步提高他們的工作熱情和主動(dòng)積極性,發(fā)揮出良好的帶頭表率作用;再者,高校要注重給予后勤管理部門的所有人員以更多的幫助和關(guān)懷,在滿足他們的基本生活需求和物質(zhì)要求的前提下,在更大的程度上滿足他們精神生活的需要,通過提供休閑娛樂場(chǎng)所、開展談心交流活動(dòng)、開展后勤管理知識(shí)小競(jìng)賽等,讓后勤管理人員在多樣的活動(dòng)中放松身心、愉悅心情,以更積極的心態(tài)應(yīng)對(duì)工作中所遇到的新挑戰(zhàn)和新任務(wù)。
結(jié)束語(yǔ)
在高校的后勤社會(huì)化改革不斷加大的今天,衡量后勤服務(wù)工作的重要標(biāo)志之一就是服務(wù)質(zhì)量的好壞以及高校師生員工的滿意程度,加強(qiáng)后勤服務(wù)工作的精細(xì)化管理十分必要。我們要不斷地總結(jié)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)和借鑒精華,探索更多的利于后勤服務(wù)實(shí)現(xiàn)精細(xì)化管理的良好途徑和策略,引導(dǎo)后勤服務(wù)與管理逐步走向更加高效能、規(guī)范化的道路,讓后勤管理部門在高校的長(zhǎng)足發(fā)展中發(fā)揮出更大的價(jià)值和作用。
參考文獻(xiàn):
小學(xué)生父親節(jié)國(guó)旗下演講稿
父愛,像冬天里一把火,像夏天里的一陣風(fēng);父愛,像春天里的第一縷陽(yáng)光籠罩大地,像秋天豐收時(shí)的喜悅滋潤(rùn)心田;父愛,像雨天里的一把傘,像海風(fēng)呼嘯時(shí)的避風(fēng)港……父愛雖然和空氣一樣,看不見,摸不著,但只要用心感受,每天都能經(jīng)歷。
父親,對(duì)于每個(gè)人來說都不僅僅是一種稱謂、一種身份,而且是一種責(zé)任、一份寄托、一座強(qiáng)有力的靠山。父愛如山,情深似海,但又有多少同學(xué)曾經(jīng)向自己的父親表達(dá)過感激之情?我們不僅應(yīng)尊重自己的父親,還應(yīng)用最真誠(chéng)的心去感謝父親,關(guān)心父親的健康,多給父親一些溫暖,在力所能及的范圍內(nèi)幫助父親,減輕父親的負(fù)擔(dān);珍惜父親的勞動(dòng)成果,不亂花錢,不浪費(fèi),努力學(xué)習(xí),用功讀書,專心聽講,積極向上,用自己的健康成長(zhǎng)去回報(bào)父親。
同學(xué)們,記住父親的愛吧,今天回家后,就微笑著向父親說一聲:“爸爸,您辛苦了,我愛您!”祝福天下所有的父親辛福安康!
中學(xué)生父親節(jié)演講稿
老師,同學(xué)們:
早上好。昨天是父親節(jié),你是否有陪著父親好好度過這個(gè)獨(dú)屬于他的節(jié)日呢?
其實(shí)父親節(jié),給了我們一個(gè)表達(dá)對(duì)父親的尊敬和感激的一個(gè)很好的機(jī)會(huì)。尊重長(zhǎng)輩是中國(guó)的傳統(tǒng)美德,孝敬父母也是道德對(duì)我們的要求,作為中國(guó)新一代的建設(shè)者,這種傳統(tǒng)道德品質(zhì)是不能丟失的。但對(duì)父親的感謝,更多應(yīng)該是發(fā)自于我們的內(nèi)心,發(fā)自于我們內(nèi)心中對(duì)父親的愛。我們是不是應(yīng)該像鳥兒和樹葉一樣知恩,用同樣的愛回報(bào)父親呢?
作為子女,我們應(yīng)該把每天都當(dāng)成父親節(jié)。我們要時(shí)刻銘記著父親對(duì)我們的養(yǎng)育之情,對(duì)我們所付出的一切。表達(dá)對(duì)父親的感激,只需要我們一顆真誠(chéng)愛父親的心。不用華麗的開場(chǎng),也不用精致的禮物,只要一句簡(jiǎn)簡(jiǎn)單單而又滿懷真情的問候就可代替千言萬(wàn)語(yǔ),學(xué)業(yè)上取得的些許成就就會(huì)勝過一切。父親總是期待自己的孩子能夠翱翔天空傲視世界,我們應(yīng)該不負(fù)所望地好好學(xué)習(xí),成就自己的理想和父親的期望。正如貝東芬所說的,你的父親感到榮耀的莫過于你以最大的熱誠(chéng)繼續(xù)你的學(xué)業(yè),并努力奮發(fā)以期成為一個(gè)誠(chéng)實(shí)而杰出的人。在以后我們也會(huì)成為了自己孩子的父母,我們對(duì)長(zhǎng)輩的敬愛之情卻是永遠(yuǎn)不能消失的。
如果昨天沒有好好陪伴著父親的同學(xué),不妨今天回家時(shí),給父親沏一壺茶,給父親一個(gè)大大的擁抱,對(duì)父親說一句您辛苦了。
是誰(shuí)用虬勁的臂膀,為我們撐起一片燦爛的天空!是誰(shuí)用勤勞的雙手,為我們構(gòu)建一個(gè)幸福的家園!是誰(shuí)給了我們一片藍(lán)天,給了我們一方沃土!是您,父親,一個(gè)平凡而又偉大的名字!父愛如傘,為你遮風(fēng)擋雨;父愛如雨,為你濯洗心靈;父愛如路,伴你走完人生。
關(guān)于父親節(jié)由來演講稿
大家早上好!
我今天國(guó)旗下講話的主題是《父親節(jié)的來歷》,昨天是6月16日,是今年的父親節(jié),你們有沒有給自己的父親獻(xiàn)上節(jié)日的禮物呢?
世界上的第一個(gè)父親節(jié),1910年誕生在美國(guó)。人們?cè)趹c祝母親節(jié)的同時(shí),并沒有忘記父親的功績(jī)。當(dāng)時(shí),凡是父親已故的人都佩戴一朵白玫瑰,父親在世的人則佩戴紅玫瑰。這種習(xí)俗一直流傳至今。但是開始時(shí)父親節(jié)的日期各不相同,而且有的地方用蒲公英作為父親節(jié)的象征,有的地方則用襯有一片綠葉的白丁香作為父親節(jié)的象征。直到1934年6月,美國(guó)國(guó)會(huì)才統(tǒng)一規(guī)定6月的第三個(gè)星期日為父親節(jié)。
后來,全世界有二十多個(gè)國(guó)家通過教堂儀式,送卡和禮物來紀(jì)念父親節(jié)。很多人認(rèn)為給父親買禮物最難,其實(shí)有很多有趣的,合適的禮物是會(huì)令父親們開心的。
同學(xué)們,其實(shí)你們可以自己動(dòng)手設(shè)計(jì)一張賀卡,寫上自己的心理話,或者自己畫一幅畫,或者為父親做一些力所能及的家務(wù)活,等等,作為自己送給父親的節(jié)日的禮物。
當(dāng)然,做一個(gè)聽話、懂事的好孩子,自覺、認(rèn)真學(xué)習(xí),考出好成績(jī),這是獻(xiàn)給父親最好的節(jié)日禮物,以感念父親的養(yǎng)育之恩。
今天的國(guó)旗下講話到此結(jié)束,謝謝大家!
為了我們這個(gè)家,爸爸也付出了許多,這樣,才有我們圓滿的家庭!最后,我要感謝所有的父親,并說一聲“父親節(jié)快樂!”
【摘要】
目的為黃精屬部分藥用植物建立聚類分析,對(duì)黃精屬藥用植物的分類進(jìn)行研究。方法采用原植物鑒定、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)、簡(jiǎn)單序列重復(fù)(ISSR)手段,對(duì)隨機(jī)引物進(jìn)行篩選,通過1.8%瓊脂糖凝膠電泳分離PCR產(chǎn)物。結(jié)果篩選23種RAPD引物,5種ISSR引物,經(jīng) PCR擴(kuò)增產(chǎn)生足夠的多態(tài)性譜帶用于分析。結(jié)論采集不同產(chǎn)地的玉竹、小玉竹、多花黃精出現(xiàn)了一定程度的變異。RAPD,ISSR方法可以從分子水平區(qū)分黃精屬藥用植物。
【關(guān)鍵詞】 黃精屬;聚類分析;RAPD;ISSR
Abstract:ObjectiveTo establish the systematic cluster analysis for the relationship of the accessions of Polygonatum and give some information for the classification of plants which belong to Polygonature.Methods Identification of original plant, RAPD and ISSR were used. All of the samples were amplified by PCR system and separated by 1.8% electrophoresis. Results23 arbitrary premiers were evaluated for the analysis of RAPD, 5 arbitrary premiers were evaluated for the analysis of ISSR, the primers could yield enough polymorphic bands for the analysis. ConclusionThe plants such as P. odoratum, P. humile and P. cyrtonema collected from different areas also have some difference. RAPD and ISSR can be used for the identification of Polygonatum in molecular level.
Key words:Polygonatum; Systemic cluster analysis; RAPD; ISSR
黃精屬在全世界約40種,我國(guó)有31種,分布于全國(guó)各地,尤以西南地區(qū)居多。2005版《中國(guó)藥典》記載中藥黃精為百合科植物滇黃精Polygonatum kongianum Coll.et Hemsl、黃精P. sibiricum Red.、多花黃精P. cyrtonema Hua.的干燥根莖。玉竹為百合科植物Polygonatum odoratum(Mill.)Druce的干燥根莖[1]。自1875年Baker將黃精屬分為互生葉類Alternifolia、輪生葉類Verticillata、對(duì)生葉類Oppositifolia 3個(gè)類群之后,該屬各種之間的關(guān)系至今仍存在爭(zhēng)議,尚未見到較為全面的研究。Baker劃分的這三個(gè)類群顯然是不很合適的,過分地著重了葉序這個(gè)性狀,從我國(guó)大量的材料來看,葉序這個(gè)性狀并不十分穩(wěn)定,在同一個(gè)種內(nèi)都有變化[2]。Shian WU等[3]從形態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)、葉綠體DNA序列探討了春水玉竹的位置,認(rèn)為春水玉竹Polygonatum simizui Kitag.應(yīng)從玉竹中劃分出來,獨(dú)立成種。臨床使用中藥黃精和玉竹時(shí),也經(jīng)常發(fā)現(xiàn)摻偽現(xiàn)象[4] ,這與分類上的爭(zhēng)議也有一定的關(guān)系。
隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA技術(shù)(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)是20世紀(jì)90年展起來的分子標(biāo)記技術(shù),能客觀地揭示供試材料間DNA的差異,操作簡(jiǎn)便、快速。簡(jiǎn)單序列重復(fù)(Inter-Simple Sequence Repeat,ISSR.)分子標(biāo)記是Zietkiewicz E在1994年提出的技術(shù)。具無需知道任何靶標(biāo)序列的微衛(wèi)星背景信息、遺傳多態(tài)性高、檢測(cè)快速的特點(diǎn),經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明是可靠、且可提供有關(guān)基因組豐富信息的DNA指紋技術(shù)。為了獲得穩(wěn)定性、重復(fù)性與清晰度均較好的譜帶,本文綜合以上兩種方法,查閱大量文獻(xiàn),自行設(shè)計(jì)引物,篩選出特異性引物,結(jié)合原植物鑒定,探討了玉竹、小玉竹、黃精、長(zhǎng)梗黃精、多花黃精的親緣關(guān)系。
1 器材與方法
1.1 試劑
瓊脂糖(Promega公司)、Taq酶、dNTP、引物、DL-2000、MgCl2、6×加樣緩沖液、10×PCR緩沖液(寶生物公司)、溴化乙啶(EB)(Sigma公司)、三(羥甲基)氨基甲烷(Tris,天津市凱通化學(xué)試劑有限公司)、其它試劑為分析純。CTAB提取液[2%(W/V)CTAB,100mM Tris-HCl, 20mM EDTA, 1.4M NaCl, 2%二巰基乙醇,pH8.0)。CTAB/NaCl溶液:(10% CTAB ,0.7M NaCl);CTAB沉淀液[1%(W/V)CTAB, 50mM Tris-HCl, 10mM EDTA, pH8.0 ];高鹽TE緩沖液[10mM Tris-HCl, 10mM EDTA, 1M NaCl, pH8.0]。
1.2 儀器
TGL-16G型臺(tái)式高速離心機(jī)(上海醫(yī)用分析儀器廠);HH-42型快速恒溫?cái)?shù)顯水箱 (常州國(guó)華電器有限公司);UV-240 紫外分光光度儀(Shimadzu公司);2400型PCR儀(GeneAmp公司)。凝膠電泳儀(DYY-Ⅲ33A型,北京市六一儀器廠)。
1.3 材料
采自天津、河北省、江西省和北京植物園等地。材料來源見表1。表1 材料來源(略)
2 方法
2.1 原植物鑒定本次采集的黃精屬Polygonatum植物分種檢索如下[2]。
2.2 引物篩選及RAPD分析[5,6]
選取GTTTCGCTCC,TGCTCTGCCC,TGCGCCCTTC等 23條隨機(jī)引物,分別放入反應(yīng)體系并按照下列比例,加入其它組分,其中模板DNA濃度為5ng/μl。
RAPD擴(kuò)增反應(yīng)總體積為25.2 μl:5 μl 5 ng/μl模板DNA、2.5 μl 10 μM引物、2.5μl各為2.5 mM dNTPs、2.5 μl PCR緩沖液、3 μl 25 mM MgCl2、0.2 μl Taq酶、9.5 μl高壓水,混勻,擴(kuò)增。
擴(kuò)增程序: 第1階段,預(yù)變性94℃,3 min;第2階段,每個(gè)循環(huán)94℃變性1 min,37℃退火1 min,72℃延伸2 min,共40個(gè)循環(huán);第3階段,72℃繼續(xù)延伸4 min,4℃儲(chǔ)存。配制1.8%瓊脂糖凝膠(含EB),在1×TAE緩沖液中電泳,電泳電壓70 V,凝膠成像分析系統(tǒng)拍照,選取擴(kuò)增效果較好的引物用作最終的分析。
2.3 引物篩選及ISSR分析[7,8]
ISSR標(biāo)記擴(kuò)增反應(yīng)總體積為25.2 μl:7.5 μl 5 ng/μl模板DNA,1.25 μl 10 μmol/L引物,2.5 μl各2.5 mmol/L dNTPs,2.5 μl 25 mmol/L MgCl2 ,2.5 μl PCR緩沖液、0.2 μl Taq酶,8.75 μl高壓水,混勻,擴(kuò)增。
第1階段,預(yù)變性94℃,5min;第2階段,每個(gè)循環(huán)94℃變性45 s,52.3℃退火60 s,72℃延伸90 s,共41個(gè)循環(huán);第3階段,72℃繼續(xù)延伸7 min,4℃儲(chǔ)存。配制1.8%瓊脂糖凝膠(含EB),在1×TAE緩沖液中電泳,電泳電壓為70V,用凝膠成像分析系統(tǒng)觀察、拍照。引物 (AC)8T,(ATG)5,(CA)8G,(TC)8G,(AG)8T產(chǎn)生條帶較好,可用于分析。
3 結(jié)果
3.1 RAPD分析結(jié)果
電泳圖譜中有帶計(jì)為1,無帶計(jì)為0。樣本間的遺傳相似性用遺傳距離D衡量,其中Nx、Ny分別為樣品x和樣品y所顯現(xiàn)的總條帶數(shù),Nxy為兩個(gè)樣本共有的條帶數(shù)。D=1-2Nxy/(Nx+Ny)。結(jié)果見表2~3。表2 通過RAPD法得到的各個(gè)樣品的遺傳距離(略)表3 通過RAPD法得到的不同產(chǎn)地玉竹的遺傳距離(略)
3.2 ISSR分析結(jié)果見表4~5。表4 通過ISSR標(biāo)記法得到的各個(gè)樣品的遺傳距離(略)表5 通過ISSR法得到的不同產(chǎn)地玉竹的遺傳距離(略)
4 討論
RAPD結(jié)果產(chǎn)生的多態(tài)性條帶雖較多,但存在穩(wěn)定性、重現(xiàn)性差的缺點(diǎn)。相對(duì)于RAPD法,ISSR法所選引物產(chǎn)生多態(tài)帶數(shù)目較少,但重復(fù)性遠(yuǎn)比RAPD好。這是因?yàn)樵摲椒ǖ耐嘶饻囟容^高,且本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用梯度PCR儀,如PTC-200型梯度PCR儀能達(dá)到的最低溫度為42℃,采用ISSR標(biāo)記法有利于選擇恰當(dāng)?shù)耐嘶饻囟?,同時(shí)避免了溫度過低引起的非特異性擴(kuò)增反應(yīng),提高了整體反應(yīng)的重復(fù)性。
玉竹與黃精的遺傳距離比較近,在0.222~0.368之間。雖然玉竹與小玉竹均具有互生葉序,但也存在一定差異、遺傳距離較遠(yuǎn)。它們的遺傳距離在0.227~0.579之間。本次從不同產(chǎn)地采集的小玉竹、多花黃精出現(xiàn)了一定程度的變異,其遺傳距離較大,為鑒定不同產(chǎn)地的同種藥材奠定了基礎(chǔ)。
從天津城郊的八仙山、九山頂?shù)貐^(qū),河北省的霧靈山區(qū),江西省九江山區(qū),這4個(gè)采樣點(diǎn)所采集的玉竹已經(jīng)發(fā)生了一定程度的變異,可能由于各采樣點(diǎn)的氣候,土壤等條件不同,使之發(fā)生了一定程度的變異。揭示了長(zhǎng)期在不同環(huán)境中生長(zhǎng)造成其遺傳特征發(fā)生的某些變化。人們可通過所選引物擴(kuò)增產(chǎn)生的多態(tài)性條帶對(duì)不同產(chǎn)地玉竹的道地性進(jìn)行更深一步研究。通過ISSR標(biāo)記分析也可以考察玉竹的遺傳關(guān)系,其結(jié)論與RAPD的結(jié)論相近,但數(shù)值略小于RAPD,可能是由于ISSR標(biāo)記法本身的退火溫度較高所致,尚需進(jìn)一步增加引物的數(shù)量來探討。
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12歲時(shí),他死活不肯讀書,跟在父親背后給他幫忙。那時(shí)父親在一家工廠做電焊工,一個(gè)月一百六十五塊錢的工資,養(yǎng)一個(gè)上有老下有小的家。父親穿著黑乎乎的工作服,趴在高高的腳手架上,手里的焊槍火星四濺。他給父親遞鋼管,眼睛好奇地盯著那些四下飛濺的火花看。飛揚(yáng)的焊花,仿佛綻放的煙花,絢爛耀眼。他呆呆看著,一時(shí)竟失了神。父親抬手就把手中的面罩朝他身上砸去:“你還想不想要眼睛?戴上眼鏡去?!?/p>
他終于還是被焊花刺傷了眼睛,眼睛紅腫著,又澀又痛又癢,不斷地流眼淚,眼前模糊一片。他跟父親商量,能不能請(qǐng)假休息一天,父親虎著臉不理他,照樣把他指揮得團(tuán)團(tuán)轉(zhuǎn):“鉗子……扳手……焊條……”旁邊一起干活的人說:“老周,這是你兒子吧?眼睛刺成這樣了,去找點(diǎn)奶給他滴滴啊……”父親沒說話他正好走過來,把肩上扛的鋼筋“嘩啦”一下撂在地上,甕聲甕氣地說:“我不是他兒子!”
父親握著焊槍的手,突然地抖了一下,焊槍夾著的焊條落在地上,一串明亮的火花跟著濺落在父親的衣服上。父親蹲著下身,把焊條撿起來,重新夾好,燦爛的火花一閃一閃的,在火光的映照中,他看見父親掩在面罩后面的臉有幾分凄然,嘴角和眼角劇烈地抖動(dòng)著。
那天下班后,他拿著飯盒去食堂打飯,路過食堂對(duì)面的家屬院。模模糊糊的,他看見父親的身影。父親懷里抱著一個(gè)孩子,孩子不停地哭,父親來回地轉(zhuǎn)著圈,嘴里“哦哦”哄著。父親的聲音全沒有平日對(duì)他的粗暴,而是非常的溫柔。旁邊坐著一個(gè)女人,背對(duì)著父親,問:“半杯子夠嗎?”父親躬著腰,很謙卑地連聲說:“夠了夠了……”
他心中疑竇頓生,也顧不得眼睛疼,緊走幾步跑過去,那女人正好轉(zhuǎn)過身子,一邊整理衣襟一邊把半杯子奶遞給父親。女人說:“看夠不夠,不夠再來??蓜e再買奶粉麥乳精了,你也是為了孩子,都怪不容易的……”
父親連聲應(yīng)著,轉(zhuǎn)回身看見他,狠狠瞪他一眼,端著半杯奶走了。
那天晚上父親幾乎一夜沒睡,隔兩個(gè)小時(shí)便給他眼睛里滴幾滴奶,又用紗布蘸了奶敷在他的眼睛上。父親粗糙的手拂過他的面頰,很溫暖。
第二天起床,眼睛好了。他的心里卻有些微的遺憾:要是眼睛一直不好,他是不是可以多享受一點(diǎn)父親的溫柔呢?
我就是要飯,也要繞過你家走
他跟著父親,在那個(gè)廠里一干就是6年。從一個(gè)懵懂少年長(zhǎng)成英俊青年。但是他和父親的關(guān)系,卻一點(diǎn)都沒有改善。只是,從前是父親打他罵他看不慣他,現(xiàn)在反過來了。他看不慣父親總是跟人吹牛夸夸其談,埋怨父親做事沒有主心骨,還有,父親頭腦簡(jiǎn)單容易沖動(dòng),每次出去,不是被人騙了買美元買回來一堆廢紙,就是恭恭敬敬抱回一尊金佛,回來才發(fā)現(xiàn)原來是銅鑄的。
每次看著那些辛辛苦苦的血汗錢被父親輕飄飄地扔出去,他就恨得牙癢癢。但他從來不會(huì)像父親那樣,心里不滿就摔盆砸碗亂發(fā)脾氣。他生氣時(shí)只是黑著一張臉,沉默寡言,陰得能擰下來水。他知道,外表強(qiáng)大的父親,其實(shí)最怕他這一招。
他羽翼漸豐,蠢蠢欲動(dòng),時(shí)刻尋找能離開父親的機(jī)會(huì)。恰好這時(shí)候他們那個(gè)工廠因?yàn)樾б娌?,他就和父親雙雙下崗了。下崗之后父親很失落,好一陣子情緒低落,動(dòng)輒就對(duì)母親大發(fā)雷霆,家里到處都是火藥味。他卻如魚得水,四處托朋友找門路。沒過多久,他的電氣焊修理部就掛牌營(yíng)業(yè)了。
開業(yè)那天,父親背著手在他租來的那間門面房里轉(zhuǎn)過來轉(zhuǎn)過去,試試電源開關(guān),檢查工具箱里的工具,再看看街上來來往往的人。他從父親身邊過來過去,他看得出父親眼里的歡喜和憂慮,卻不理,只是熱情地招呼顧客,從容堅(jiān)定地回答他們提出的問題。他在心里說:“周大賓,現(xiàn)在你知道我不是窩囊廢了吧?”
店里生意不錯(cuò),他專門請(qǐng)了幾個(gè)熟練的師傅,每個(gè)月,他按時(shí)把一沓鈔票交到父親的手里,他說:“你們啥也別做,就在家安心養(yǎng)老,別給我添亂就行了?!?/p>
父親每天中午給他送飯,他總是在忙,很少和父親說話。父親在店里轉(zhuǎn)來轉(zhuǎn)去,一會(huì)兒摸摸焊槍,一會(huì)兒給面罩換個(gè)鏡片。有一次母親跟他說:“要不,讓你爸去幫著你干吧,他天天在家閑得無聊,都快悶出病來了?!彼鞠刖芙^,又想到父親落寞的眼神,就答應(yīng)了。
只做了7天,父親就再也不肯去了。那天他接了一樁外面的活,店就交給了父親。晚上回來盤帳,發(fā)現(xiàn)竟收了一張假幣。他火冒三丈,把那張錢撕碎了扔在地上,沖父親吼:“你怎么會(huì)那么笨!”
父親再?zèng)]去過他的店,自己在街口擺了個(gè)充氣補(bǔ)胎的攤子,打一次氣兩毛錢,補(bǔ)個(gè)胎兩塊錢。父親說:“我就是要飯,也要繞過你家走!”
你說誰(shuí)是雜種
他的生意越來越紅火,擴(kuò)大了店面,雇了十幾個(gè)工人,買了車,很像樣子了。
每次,他開著車回家,看到父親在街口趴在地上給人補(bǔ)車胎,兩手油污頭發(fā)蓬亂,心里就有說不出的滋味。其實(shí)他每月給父母的錢,完全可以讓他們過舒舒服服的日子,可是不管他拿回家多少錢,父親都分文不動(dòng),依然每天出來補(bǔ)他的車胎。辛辛苦苦一天,有時(shí)掙10塊,有時(shí)掙20塊,父親說:“不要你的錢,我自己能掙,也夠我和你媽花了?!?/p>
28歲那年,他愛上一個(gè)漂亮的女人。他帶她回去見父母,直截了當(dāng)?shù)卣f:“這就是我為你們選的兒媳婦?!?/p>
父親明顯地不喜歡她,卻也不說,仍然做了一桌子的好菜,并沒讓他難堪。但是等送她走了之后,父親堅(jiān)決地表示反對(duì),父親說:“這女人一臉的妖氣,怕不是個(gè)過日子的人,你們將來未必能長(zhǎng)久?!?/p>
他那時(shí)正為她癡迷沉醉,自然聽不進(jìn)父親的話,硬邦邦地和父親頂了起來。父親一時(shí)急了眼,抓起桌上的啤酒瓶“砰”地往墻上一擊,舉著剩下半截的瓶子就朝他刺來,破口大罵:“小雜種,還反了你了!”他一伸手,穩(wěn)穩(wěn)地接住父親的手腕,輕蔑地直逼著父親的眼睛,冷冷地反問:“你說誰(shuí)是雜種?”
父親一時(shí)竟愣住了,嘴角和眼角又開始劇烈地跳動(dòng),僵持了一會(huì)兒,父親終于頹然退回沙發(fā)上,再無一言。
他結(jié)婚的時(shí)候,父親沒有參加?;槎Y上,他喝醉了,攬著新娘的肩,一遍遍地說:“我一定要證明給他看,我的選擇是對(duì)的?!?/p>
然而婚后的日子并不像他想像的那樣和美,女人花錢如流水,他賺的那點(diǎn)錢,根本經(jīng)不起折騰。結(jié)婚一年半,女人便另覓新歡,棄他而去。
我其實(shí)是愛你的
離婚后他又搬回去和父母一起住,父親仍然每天去街口出攤,有時(shí)候他會(huì)坐在父親的攤上,陪著父親抽支煙;有時(shí)他回來會(huì)帶幾個(gè)小菜,陪父親一邊喝酒一邊看電視。兩個(gè)人仍然很少說話,但是他覺得自己的心,離父親越來越近。
春天的時(shí)候父親膽結(jié)石發(fā)作,疼痛難忍。他帶父親去醫(yī)院做手術(shù),父親竟然很聽話,從體檢到手術(shù)前,都很配合。進(jìn)手術(shù)室前一陣,孤零零地站在走廊中,遠(yuǎn)遠(yuǎn)地朝他揮手。他走過去,父親看著他,欲言又止。他明白父親是怕手術(shù)發(fā)生不測(cè),想囑托他什么。他緊緊地握了握父親的手,想安慰父親幾句,卻終究沒有說出口。卻在父親的掌心里,發(fā)現(xiàn)一張已經(jīng)濡濕的紙條。
父親進(jìn)了手術(shù)室,他坐在外面的長(zhǎng)椅上,展開紙條,上面是父親凌亂的筆跡:“正兒,考慮了很久,還是決定把這件事情告訴你。我怕萬(wàn)一我有什么不測(cè),它會(huì)成為你永遠(yuǎn)的遺憾……32年前,你父母離婚的時(shí)候,你媽已經(jīng)懷上了你。我和你媽結(jié)婚七個(gè)月就生下了你……所以,我不是你的親生父親……我脾氣不好,打過你罵過你,你或許也在心里怨恨過我。但是你要知道,我其實(shí)是愛你的……”