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液相色譜儀范文第1篇

關(guān)鍵詞：液相色譜技術(shù)；高效液相色譜儀；檢定；氣相色譜

中圖分類號(hào)：O657文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1009-2374（2009）16-0168-02

高效液相色譜法具有分離速度快，分離效能高，檢測(cè)靈敏度高，選擇性能高的特點(diǎn)，而且液相色譜對(duì)樣品使用范圍廣，只要求樣品能制成溶液，流動(dòng)相可選擇的范圍也很寬，因此現(xiàn)在液相色譜在許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。其中高效液相色譜儀是分析實(shí)驗(yàn)室的常用分析儀器之一，它擔(dān)負(fù)著食品、勞衛(wèi)等諸多指標(biāo)的檢測(cè)，儀器條件經(jīng)常變化，色譜柱經(jīng)常拆卸，因此需要對(duì)色譜儀經(jīng)常檢定以發(fā)現(xiàn)儀器性能的變化。但從我國(guó)目前的實(shí)際情況看，不少使用分析儀器的工作者常因?yàn)椴皇煜x器的結(jié)構(gòu)原理，不甚了解儀器的技術(shù)指標(biāo)對(duì)分析測(cè)定結(jié)果的影響，而不能將儀器調(diào)整到最佳狀態(tài)，從而直接影響到所測(cè)定數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。因此筆者從高效液相色譜儀的組成與基本原理概述出發(fā)，探討了檢定液相色譜儀應(yīng)注意的幾個(gè)問題。

一、高效液相色譜儀的組成與原理

高效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解析的分配過程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分并依次從柱內(nèi)流出，通過檢測(cè)器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。

二、高效液相色譜儀的主要檢定項(xiàng)目

對(duì)氣相色譜儀的檢定，應(yīng)依據(jù)國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程（JJG 700-1999）《氣相色譜儀》，主要檢定項(xiàng)目有柱溫性能、基線噪音、基線漂移、采集系統(tǒng)、檢測(cè)器等。

（一）柱溫性能、基線噪音、基線漂移的檢定

對(duì)于工廠中使用的某些液相色譜儀，許多色譜柱溫的控制只有恒溫操作或者只使用恒溫操作，從不使用程序升溫控制，此時(shí)，可只檢定恒溫的控溫精度和穩(wěn)定性，對(duì)程序升溫控制的重復(fù)性指標(biāo)可暫不檢定。某些氣相色譜儀只承擔(dān)氣體樣品的分析任務(wù)，且只使用低柱溫，有的甚至在室溫下操作，此時(shí)，檢定柱溫時(shí)，只能在其使用的色譜柱溫度或者低于老化溫度的狀態(tài)下測(cè)定柱溫的控溫精度和穩(wěn)定性，以及基線噪音和基線漂移等指標(biāo)。否則，柱系統(tǒng)內(nèi)長(zhǎng)期滯留的重組分或雜質(zhì)將會(huì)隨溫度的升高而流出，這將會(huì)給基線的穩(wěn)定帶來極大的影響，甚至?xí)斐傻蜏毓潭ㄏ嗟牧魇Щ蚴?。某些承?dān)組成復(fù)雜的樣品分析的氣相色譜儀，配置有多色譜柱、多切換閥的多維色譜分析系統(tǒng)，而且，所配置的數(shù)據(jù)處理程序和柱切換程序都是專用的。由于柱系統(tǒng)連接復(fù)雜，拆換色譜柱困難，且生產(chǎn)控制分析要求不許輕易更改程序和拆換色譜柱，所以，只能在其使用的柱溫條件下檢定柱溫的控溫精度等指標(biāo)。

（二）色譜數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)的檢定

在檢測(cè)過程中，色譜峰面積的記錄一般由原色譜儀所配用的記錄儀、積分儀或色譜數(shù)據(jù)工作站完成，然后根據(jù)所采集的色譜圖或峰面積數(shù)據(jù)對(duì)基線噪音、基線漂移、檢測(cè)器的靈敏度或檢測(cè)限等指標(biāo)進(jìn)行計(jì)算。在實(shí)際工作中發(fā)現(xiàn)，由于積分儀和色譜數(shù)據(jù)工作站的制造廠家、型號(hào)的不同，所得到的峰面積也有所差別，由此計(jì)算的檢測(cè)器靈敏度或檢測(cè)限的差別也較大，有的甚至相差幾倍或十幾倍。為此，我們采用了不同的積分儀和色譜數(shù)據(jù)工作站對(duì)同一臺(tái)色譜儀的同一信號(hào)進(jìn)行了采集，并進(jìn)行了部分?jǐn)?shù)據(jù)比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)所采集的峰積分面積的大小差別較大。試驗(yàn)表明，HP3392積分儀積分峰面積是C-R6A積分儀積分峰面積的7.95倍（約8倍）；SP4290M積分儀積分峰面積是C－R6A積分儀積分峰面積的2倍。所以，在使用數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)時(shí)，應(yīng)特別注意不同的色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的積分峰面積的差別，并在計(jì)算時(shí)加以校正。

（三）檢測(cè)器的檢定

檢測(cè)器的種類很多，應(yīng)根據(jù)所測(cè)物質(zhì)的特性，選擇適當(dāng)?shù)臋z測(cè)器。在高效液相色譜儀中使用最廣泛的為紫外吸收檢測(cè)器。它分為固定波長(zhǎng)、可變波長(zhǎng)和二極管陣列檢測(cè)器三種。固定波長(zhǎng)紫外吸收檢測(cè)器僅由低壓汞燈提供固定波長(zhǎng)254nm或280nm的紫外光?？勺儾ㄩL(zhǎng)紫外吸收檢測(cè)器（UVD），由氘燈和鎢燈作為光源分別提供紫外光和可見光。由于可選擇的波長(zhǎng)范圍很大，既提高了檢測(cè)器的選擇性，又可選用組分的高靈敏吸收波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定，從而提高了檢測(cè)的靈敏度。二極管陣列檢測(cè)器（PDAD）是后來發(fā)展起來的一種新型紫外吸收檢測(cè)器，其可獲得吸收度隨時(shí)間與波長(zhǎng)的變化的三維空間的立體色譜圖，用于被測(cè)組分的定性分析和定量測(cè)定。蒸發(fā)激光散射檢測(cè)器（ELSD）與紫外吸收檢測(cè)器相比較，它消除了溶劑的干擾和由于溫度變化引起的基線漂移。值得注意的是，實(shí)驗(yàn)完畢沖洗色譜柱時(shí)，首先要關(guān)掉檢測(cè)器，目的是為了節(jié)約光源，保證燈的有效使用，此外，盡量斷開色譜柱與檢測(cè)器的連接，防止污染檢測(cè)池。

三、高效液相色譜儀檢定應(yīng)注意的問題

用于工業(yè)應(yīng)用的液相色譜儀大部分項(xiàng)目可按規(guī)程要求檢定，但在檢定檢測(cè)限這一項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)時(shí)，常遇到一些困難。比如用于白酒分析的液相色譜儀的檢測(cè)器是氫火焰離子化（FID）檢測(cè)器，色譜柱主要是DNP-TW填充柱或毛細(xì)管柱，規(guī)程中規(guī)定用標(biāo)準(zhǔn)色譜柱和濃度為100 mg/L的正十六烷-異辛烷標(biāo)準(zhǔn)溶進(jìn)行檢定，盡管我們把色譜儀的各種氣體流速、柱箱溫度、汽化室溫度、檢測(cè)室溫度、儀器衰減等條件一一考慮進(jìn)去，也不容易得到理想的色譜圖，即使得到符合要求的色譜圖，也花去很多時(shí)間，影響企業(yè)使用。遇到的問題與檢定方法如下：（1）峰面積重復(fù)性差。由于進(jìn)樣閥漏液或加樣針不到位會(huì)影響到峰面積的重復(fù)性。檢定方法：進(jìn)樣閥漏液應(yīng)更換進(jìn)樣閥墊圈：并且保證加樣針插到底，注射樣品溶液后需快速、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài)，以保證進(jìn)樣量的準(zhǔn)確。（2）主峰不佳或峰分叉。長(zhǎng)期使用后的色譜柱，由于有雜質(zhì)進(jìn)入，會(huì)使色譜柱入口處的固定相“板結(jié)”并在流動(dòng)相所產(chǎn)生的高壓作用下，形成柱頭的塌陷，色譜柱被污染。檢定方法：先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇：異丙醇沖洗柱子，再用甲醇沖洗，然后用純水沖洗，最后甲醇沖洗正向柱子30min以上。

總之，液相色譜儀檢定過程中，每項(xiàng)檢定項(xiàng)目的檢定結(jié)果獨(dú)立給出，因此，進(jìn)行檢定結(jié)果來源分析及其評(píng)定時(shí)要針對(duì)每項(xiàng)進(jìn)行。其中儀器型號(hào)不同、所使用計(jì)量器具不同，其評(píng)定結(jié)果也不同，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行分析評(píng)定。比如當(dāng)儀器性能發(fā)生變化時(shí)，用不同的色譜柱、不同的標(biāo)準(zhǔn)品分別檢定儀器，判定色譜柱和檢測(cè)器性能的改變，從而找出引起儀器性能變化的根本原因。

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液相色譜儀范文第2篇

關(guān)鍵詞：液相色譜儀；最小檢測(cè)濃度；測(cè)量不確定；標(biāo)準(zhǔn)溶液；評(píng)定

中圖分類號(hào)：TS736+.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：

對(duì)液相色譜儀測(cè)量準(zhǔn)確值的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)是按照相關(guān)的國(guó)家計(jì)量檢定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)的。在使用液相色譜儀進(jìn)行測(cè)量應(yīng)用中，液相色譜儀的最小檢測(cè)濃度的測(cè)量不確定情況可以充分反應(yīng)出液相色譜儀檢測(cè)反應(yīng)的靈敏度，而作為一個(gè)測(cè)量?jī)x器，液相色譜儀在測(cè)量應(yīng)用中的靈敏度對(duì)于測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性有著重要的影響。對(duì)于液相色譜儀的最小檢測(cè)濃度的測(cè)量不確定度評(píng)定中是通過使用萘或者甲醇作為檢定使用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行評(píng)定操作的。在應(yīng)用液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)的過程中，液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量不確定度的影響因素主要有液相色譜儀最小檢測(cè)濃度測(cè)量過程中的基線噪聲以及重復(fù)性測(cè)量誤差、檢測(cè)使用標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度情況等。本文主要通過液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量試驗(yàn)與最小檢測(cè)濃度不確定度的計(jì)算，對(duì)液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量不確定度進(jìn)行評(píng)定。在液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量試驗(yàn)中，主要是通過應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液使用液相色譜儀進(jìn)行最小濃度檢測(cè)操作，并且在檢測(cè)操作過程中，根據(jù)試驗(yàn)操作情況在檢測(cè)儀器穩(wěn)定的情況下，進(jìn)行一定時(shí)間段的基線情況采集并進(jìn)行噪聲值的計(jì)算，同時(shí)在檢測(cè)使用的標(biāo)準(zhǔn)溶液中取一定數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的溶液，進(jìn)行重復(fù)的進(jìn)樣，并且測(cè)量出標(biāo)準(zhǔn)溶液樣品的最小檢測(cè)濃度。

1、液相色譜儀最小檢測(cè)濃度計(jì)算的數(shù)學(xué)模型

在應(yīng)用相關(guān)數(shù)學(xué)原理進(jìn)行液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的結(jié)果計(jì)算中，對(duì)于液相色譜儀的最小檢測(cè)濃度的計(jì)算是通過基線噪聲情況與檢測(cè)使用標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度、重復(fù)檢測(cè)過程中標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰高值情況、檢測(cè)過程中進(jìn)入檢測(cè)應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)溶液樣品的體積等之間的相互關(guān)系，從而計(jì)算出液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的情況。如下公式關(guān)系所示。

上述公式中，CL表示液相色譜儀的最小檢測(cè)濃度值，Nd表示的是液相色譜儀最小檢測(cè)濃度過程中的基線噪聲值，c表示的是液相色譜儀最小檢測(cè)濃度過程中使用的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度情況。最后，H表示在液相色譜儀最小檢測(cè)濃度過程中標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰高值，V則表示液相色譜儀最小檢測(cè)濃度檢測(cè)中標(biāo)準(zhǔn)溶液的進(jìn)樣體積值。

2、液相色譜儀輸入量標(biāo)準(zhǔn)的不確定度評(píng)定

對(duì)于液相色譜儀最小檢測(cè)濃度測(cè)量過程中輸入量的標(biāo)準(zhǔn)不確定度的評(píng)定主要包括進(jìn)行液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量過程中的對(duì)于基線噪聲以及檢測(cè)使用標(biāo)準(zhǔn)溶液峰高、標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度、標(biāo)準(zhǔn)溶液在進(jìn)行液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量中進(jìn)樣體積等測(cè)量的不確定度的評(píng)定。

2.1 液相色譜儀測(cè)量中基線噪聲測(cè)量不確定情況

在進(jìn)行液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量過程中，對(duì)于液相色譜儀最小檢測(cè)濃度測(cè)量過程中的基線噪聲值的測(cè)量，最開始使用的是積分儀或者使用卡尺進(jìn)行液相色譜儀最小檢測(cè)濃度檢測(cè)過程中的基線噪聲值的測(cè)定的，使用這種基線噪聲測(cè)量?jī)x器進(jìn)行液相色譜儀最小檢測(cè)濃度測(cè)量過程中的基線噪聲值的測(cè)量，一般情況下，對(duì)于基線噪聲值的測(cè)量結(jié)果的不確定性在0.02左右?，F(xiàn)在對(duì)于液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量中的基線噪聲的測(cè)量使用的是色譜工作站進(jìn)行測(cè)量應(yīng)用的。使用色譜工作站進(jìn)行液相色譜儀最小檢測(cè)濃度測(cè)量中的基線噪聲情況的測(cè)量要比最開始使用的測(cè)量?jī)x器進(jìn)行基線噪聲值測(cè)量的不確定度結(jié)果要相對(duì)好一些，使用色譜工作站進(jìn)行基線噪聲情況的測(cè)量，其測(cè)量過程中的不確定度一般要小于0.01。如果在對(duì)基線噪聲測(cè)量的過程中，基線噪聲是一個(gè)均勻分布的狀態(tài)，那么使用色譜工作站進(jìn)行基線噪聲值的測(cè)量應(yīng)用，那么基線噪聲的測(cè)量不確定度為0.006，并且這種不確定度在液相色譜儀最小檢測(cè)濃度測(cè)量中，其基線噪聲的測(cè)量不確定度的還具有一定的可靠性和自由變化值。如下所示。

自由變化情況為

2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰高值不確定情況

在液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量不確定度中就有測(cè)量使用標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰高值的不確定度造成的。對(duì)于液相色譜儀最小檢測(cè)濃度過程中測(cè)量使用標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰高值的不確定誤差主要是在進(jìn)行檢測(cè)過程中由于人為操作或者定量環(huán)體積、環(huán)境因素、色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等情況原因造成的。假設(shè)進(jìn)行檢測(cè)使用的標(biāo)準(zhǔn)溶液是萘，現(xiàn)在對(duì)于萘的峰高值不確定度進(jìn)行評(píng)定。假設(shè)進(jìn)行液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量不確定度評(píng)定的試驗(yàn)應(yīng)用的是特定型號(hào)的液相色譜儀，并配備有專門進(jìn)行基線噪聲監(jiān)測(cè)的色譜工作站，那么取有一定標(biāo)準(zhǔn)量的萘溶液進(jìn)行定量的循環(huán)進(jìn)樣，那么，每次進(jìn)樣循環(huán)的萘溶液峰高值結(jié)果如下表1所示。

表1 萘溶液進(jìn)樣峰高值

根據(jù)上表中的萘峰高值結(jié)果情況就可以計(jì)算出萘的平均峰高值結(jié)果為0.820，同樣對(duì)于液相色譜儀最小檢測(cè)濃度測(cè)量不確定度評(píng)定試驗(yàn)中每次實(shí)驗(yàn)萘峰高值的誤差也可以通過相關(guān)公式關(guān)系計(jì)算得出，那么，萘溶液的峰高值不確定情況就如下所示。

2.3 檢測(cè)試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度不確定情況

在進(jìn)行液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量不確定度評(píng)定試驗(yàn)中，檢測(cè)使用的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度情況也是對(duì)于檢測(cè)測(cè)量不確定產(chǎn)生影響的因素之一。因此，對(duì)于液相色譜儀最小檢測(cè)濃度測(cè)量不確定度的評(píng)定也需要對(duì)于使用標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度不確定情況進(jìn)行評(píng)定計(jì)算。在對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)溶液的不確定度的評(píng)定中是根據(jù)國(guó)家相關(guān)中心單位給定的單位標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度不確定值進(jìn)行實(shí)驗(yàn)使用標(biāo)準(zhǔn)溶液的數(shù)量進(jìn)行濃度不確定情況的評(píng)定的。

2.4 應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)溶液的進(jìn)樣體積不確定情況

根據(jù)上文中對(duì)于液相色譜儀最小檢測(cè)濃度值的計(jì)算公式可以知道，要想得出最終的液相色譜儀最小檢測(cè)濃度情況，還需要有檢測(cè)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)溶液的進(jìn)樣體積值。同樣液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量不確定情況也是與應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣體積的不確定情況有關(guān)的。根據(jù)相關(guān)關(guān)系，標(biāo)準(zhǔn)溶液的進(jìn)樣體積的不確定情況為0.01，其中自由變化情況是

3、液相色譜儀最小檢測(cè)濃度測(cè)量不確定度的評(píng)定

根據(jù)上述液相色譜儀最小檢測(cè)濃度情況的數(shù)學(xué)公式以及對(duì)于液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量不確定度產(chǎn)生影響的基線噪聲不確定度、標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度不確定度以及標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣體積不確定度等，在綜合液相色譜儀最小檢測(cè)濃度檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)不確定度和合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度的評(píng)定、對(duì)擴(kuò)展不確定度的評(píng)定等情況，液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量不確定度為0.046，有效自由度為50。

4、結(jié)束語

總之，液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量不確定度情況受到基線噪聲的不確定度、標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的不確定度以及標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣體積的不確定度等的影響，因此，對(duì)于液相色譜儀最小檢測(cè)濃度的測(cè)量不確定度中應(yīng)注意從這些影響因素中進(jìn)行綜合考慮評(píng)定。

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液相色譜儀范文第3篇

論文關(guān)鍵詞：高效液相色譜儀；水環(huán)境；監(jiān)測(cè)；前景

一、高效液相色譜儀及其技術(shù)簡(jiǎn)介

高效液相色譜（HPLC)也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等。是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。

高效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測(cè)器(能檢測(cè)色譜柱流出組分及其量的變化的器件。指機(jī)械的、電子的或化學(xué)器件，用于區(qū)分、記錄或指示環(huán)境中某一變量的變化，如溫度、壓力、電荷、電磁輻射、核輻射、粒子或分子等。)時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。

二、高效液相色譜儀的應(yīng)用

高效液相色譜儀在水環(huán)境監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用主要分為三個(gè)方面：一方面是對(duì)傳統(tǒng)監(jiān)測(cè)項(xiàng)目指標(biāo)的監(jiān)測(cè)；一方面是針對(duì)水體中的有機(jī)物進(jìn)行監(jiān)測(cè)；另一方面是利用其高效分離的技術(shù)特點(diǎn)在對(duì)水體中污染物質(zhì)總量的監(jiān)測(cè)的基礎(chǔ)之上對(duì)不同價(jià)態(tài)及其形態(tài)的污染物進(jìn)行分類定量監(jiān)測(cè)。

（一）對(duì)傳統(tǒng)污染物的監(jiān)測(cè)

對(duì)傳統(tǒng)污染物的監(jiān)測(cè)主要是針對(duì)日常水體中常見污染物的重點(diǎn)監(jiān)測(cè)。根據(jù)國(guó)家的相關(guān)要求及其本站的實(shí)際監(jiān)測(cè)條件，對(duì)水體中主要污染物的監(jiān)測(cè)包括了重金屬元素（銅、鋅、砷、汞、鎘、鉻等）、營(yíng)養(yǎng)元素（氮、磷、鉀等）、特殊元素（硒、氯、硫等）。通過如上監(jiān)測(cè)對(duì)水體的日常污染狀況進(jìn)行把握與評(píng)價(jià)。同時(shí)，傳統(tǒng)污染物的監(jiān)測(cè)還包括了對(duì)特定企業(yè)排污點(diǎn)的污水監(jiān)測(cè)，作為其環(huán)保達(dá)標(biāo)的重要依據(jù)。

（二）對(duì)水體中的有機(jī)物

在傳統(tǒng)的污染物的基礎(chǔ)之上工業(yè)以及農(nóng)業(yè)淋容等多方面因素會(huì)對(duì)水體中造成一定的有機(jī)物污染，在針對(duì)有機(jī)物的污染監(jiān)測(cè)過程中傳統(tǒng)的監(jiān)測(cè)方法無法在精度與效率方面達(dá)到要求。在此方面應(yīng)用高效液相色譜儀在對(duì)有機(jī)物進(jìn)行定型的同時(shí)進(jìn)行定量的監(jiān)測(cè)。主要監(jiān)測(cè)的項(xiàng)目包括了，工業(yè)有機(jī)污染物（氰化物、）揮發(fā)酚、石油類、總有機(jī)物等）、農(nóng)業(yè)有機(jī)物（如殺蟲劑、除草劑、消化抑制劑）、特殊有機(jī)物（微生物代謝物、醫(yī)療污染物、生活污水等）。針對(duì)如上的有機(jī)物監(jiān)測(cè)一方面能夠?qū)λw中有機(jī)污染現(xiàn)狀進(jìn)行評(píng)價(jià)，另一方面可以鑒別污染物種類進(jìn)而對(duì)排查污染源提供一定的幫助。

（三）對(duì)不同價(jià)態(tài)及其形態(tài)的污染物的監(jiān)測(cè)

同種化學(xué)元素的不同存在價(jià)態(tài)以及形態(tài)對(duì)其生物毒性的影響至關(guān)重要。比如鉻元素在水體中存在三價(jià)與六價(jià)之分，其中三價(jià)鉻毒性較小且對(duì)在較大濃度范圍內(nèi)對(duì)人體有益，而六價(jià)鉻則表現(xiàn)為較強(qiáng)的生物毒性，在較低濃度下對(duì)人體造成較大危害。在水環(huán)境的監(jiān)測(cè)過程中傳統(tǒng)的六價(jià)鉻的監(jiān)測(cè)方法是利用六價(jià)鉻與二苯碳酰二肼的顯色反映進(jìn)行檢測(cè)的。這種檢測(cè)方式由于收到氧化還原條件的影響容易造成較大誤差，進(jìn)而使得對(duì)水體環(huán)境的判斷失準(zhǔn)。采用高效液相色譜儀能夠同時(shí)監(jiān)測(cè)同種元素的不同價(jià)態(tài)進(jìn)而對(duì)水體的污染物及其毒性進(jìn)行更好的定量分析，為后續(xù)的環(huán)境評(píng)價(jià)與治理奠定基礎(chǔ)。

三、高效液相色譜儀的特點(diǎn)

（一）高效液相色譜儀的準(zhǔn)確性

與傳統(tǒng)的檢測(cè)方法相比較，高效液相色譜儀具有更高的準(zhǔn)確性，這種準(zhǔn)確性主要表現(xiàn)在兩個(gè)方面：一方面高效液相色譜儀為全自動(dòng)檢測(cè)儀器，在避免了人為誤差出現(xiàn)的同時(shí)降低了機(jī)械誤差。而機(jī)械誤差經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的校訂之后可以得到很好的控制，這就決定了高效液相色譜儀在監(jiān)測(cè)過程中誤差較小。同時(shí)，在另一方面高效液相色譜儀在監(jiān)測(cè)原理上同樣優(yōu)于傳統(tǒng)的監(jiān)測(cè)方法，以火焰原子吸收測(cè)量水體中的重金屬濃度為例，其以火焰原子激發(fā)的峰值為測(cè)定濃度結(jié)果，在測(cè)定過程中的波動(dòng)式消耗會(huì)使得測(cè)量結(jié)果較實(shí)際濃度偏低的現(xiàn)象。而采用高效液相色譜儀則是利用全部曲線的面積來代替相對(duì)體積內(nèi)的總量，在計(jì)算優(yōu)化方面更具備準(zhǔn)確性。

（二）高效液相色譜儀的高效性

高效液相色譜儀的高效性主要表現(xiàn)為三個(gè)方面：

1、高效液相色譜儀的檢測(cè)效率本身，樣品從進(jìn)樣到出結(jié)果僅需要30秒作用的時(shí)間對(duì)于單向測(cè)定，此時(shí)間還具有一定的下降空間。

2、高效液相色譜儀的多重測(cè)定效率。在針對(duì)多項(xiàng)目的測(cè)定過程中。利用高效液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定可以單次進(jìn)樣多指標(biāo)共同檢測(cè)的效果，大大的降低了進(jìn)樣的重復(fù)性工作，提高了整體的工作效率。 　3、高效液相色譜儀的連續(xù)進(jìn)樣機(jī)制，在前一樣品轉(zhuǎn)移到檢測(cè)室后，后一樣品既可以做進(jìn)樣處理，在監(jiān)測(cè)相同的項(xiàng)目指標(biāo)的情況下，連續(xù)進(jìn)樣與單獨(dú)進(jìn)樣的監(jiān)測(cè)效率提高越30%。

此外，通過高效液相色譜儀與質(zhì)譜儀的連用可以實(shí)現(xiàn)在定量分析的基礎(chǔ)之上進(jìn)行定性的監(jiān)測(cè)。一方面省略了定性檢測(cè)的二次步驟，另一方面降低了樣品前處理的難度與過程。進(jìn)而，降低了監(jiān)測(cè)的時(shí)間。

（三）高效液相色譜儀的廣泛性

高效液相色譜儀的廣泛性主要表現(xiàn)為對(duì)監(jiān)測(cè)物質(zhì)的廣泛性，其監(jiān)測(cè)項(xiàng)目幾乎涵蓋了水體環(huán)境監(jiān)測(cè)的所有基礎(chǔ)項(xiàng)目。包括了重金屬的測(cè)定、營(yíng)養(yǎng)元素的測(cè)定、其他離子的測(cè)定、不同價(jià)態(tài)的測(cè)定、有機(jī)物的測(cè)定等等諸多方面。尤其是其針對(duì)有機(jī)物的測(cè)定方面還可以細(xì)致劃分為多環(huán)芳烴類化合物的測(cè)定、酚類化合物的測(cè)定、苯胺類化合物的測(cè)定、鄰苯二甲酸酯類化合物的測(cè)定、氯聯(lián)苯和鹵代化合物的測(cè)定、苯基脲類化合物的測(cè)定、酞酸酯類化合物的測(cè)定等等。幾乎涵蓋了所有類別的污染物種類，使得在實(shí)際的操作過程中可以根據(jù)不同的監(jiān)測(cè)目標(biāo)與監(jiān)測(cè)目的進(jìn)行合適的項(xiàng)目選擇。

四、高效液相色譜儀的應(yīng)用前景

（一）與評(píng)價(jià)軟件連用

高效液相色譜儀與評(píng)價(jià)軟件連用主要是利用高效液相色譜儀的數(shù)據(jù)收集功能以及數(shù)據(jù)計(jì)算功能。在高效液相色譜儀對(duì)數(shù)據(jù)計(jì)算的基礎(chǔ)上結(jié)合電腦的評(píng)價(jià)軟件對(duì)獲得數(shù)據(jù)進(jìn)行進(jìn)一步處理的過程。通過與評(píng)價(jià)軟件的連用可以達(dá)到在監(jiān)測(cè)的過程中根據(jù)不同的監(jiān)測(cè)目的進(jìn)行合理的評(píng)價(jià)結(jié)果輸出的方式。進(jìn)一步使得環(huán)境監(jiān)測(cè)具有高效化與準(zhǔn)確性。

在具體的操作層面其可能應(yīng)用主要分為兩個(gè)方面：一方面是利用評(píng)價(jià)軟件的評(píng)價(jià)功能對(duì)超標(biāo)樣品進(jìn)行篩選。在測(cè)定前利用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對(duì)環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行測(cè)定。而在測(cè)定的過程中利用評(píng)價(jià)軟件的篩選功能自動(dòng)對(duì)超標(biāo)樣品進(jìn)行報(bào)警或者標(biāo)紅處理，而對(duì)于未超標(biāo)樣品則可以采用忽略的處理方式。最終的數(shù)據(jù)輸出結(jié)果為超標(biāo)樣品編號(hào)與濃度。這樣能夠有效的降低環(huán)境監(jiān)測(cè)站的工作強(qiáng)度。

另一方面是利用預(yù)設(shè)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)以及不同污染物的環(huán)境效應(yīng)權(quán)重針對(duì)同一樣品的權(quán)指標(biāo)測(cè)定項(xiàng)目進(jìn)行評(píng)價(jià)報(bào)告的生成。在測(cè)定的過程中自動(dòng)的對(duì)比國(guó)家環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)而生成科學(xué)的環(huán)境評(píng)價(jià)報(bào)告，為后續(xù)的環(huán)境治理提供一定的依據(jù)。

（二）與質(zhì)譜儀連用

高效液相色譜儀只能夠定性的分析被監(jiān)測(cè)物質(zhì)，或者通過對(duì)吸收光譜的設(shè)定來測(cè)定特定物質(zhì)的濃度，而對(duì)于未知物質(zhì)的監(jiān)測(cè)則存在一定的不足。此方面的缺陷使得其在使用的過程中測(cè)定項(xiàng)目具有一定的盲目性。通過高效液相色譜儀與質(zhì)譜儀的連用可以在同一樣品測(cè)定的情況下測(cè)定未知樣品中的特定物質(zhì)種類以及物質(zhì)濃度。方便并拓寬了水環(huán)境監(jiān)測(cè)的廣度。

（三）與連續(xù)進(jìn)樣裝置的連用

高效液相色譜儀具有一定的連續(xù)進(jìn)樣能力。但是，此種進(jìn)樣依舊采用手動(dòng)的模式進(jìn)行。在手動(dòng)模式下，一方面對(duì)進(jìn)樣效率的提高程度不顯著。另一方面則表現(xiàn)為對(duì)進(jìn)樣的準(zhǔn)確程度不精確。因此，采用高效液相色譜儀與連續(xù)進(jìn)樣裝置的連用在進(jìn)一步提高工作效率的同時(shí)，保障了進(jìn)樣的準(zhǔn)確性與測(cè)定的自動(dòng)化程度。在效率與精度方面對(duì)高效液相色譜儀的檢測(cè)均是一種提高。

液相色譜儀范文第4篇

關(guān)鍵詞：醫(yī)藥院校；高效液相色譜；管理

高效液相色譜法是儀器分析的一種重要方法[1]，是醫(yī)藥院校中醫(yī)學(xué)類、藥學(xué)類及其相關(guān)專業(yè)必需的實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容，是實(shí)踐性操作性專業(yè)性很強(qiáng)的一種分析方法，在教學(xué)和科研方面為培養(yǎng)技能型醫(yī)藥專才發(fā)揮著重要作用。高效液相色譜適用于分析受熱不穩(wěn)定易分解的、高沸點(diǎn)、不易揮發(fā)的、分子量較大、不同極性的天然和合成有機(jī)化合物，應(yīng)用范圍十分廣泛，具有高效率、高分辨率、高靈敏度、高速度的特點(diǎn)。而且，儀器十分昂貴，并要經(jīng)常維護(hù)，因而，對(duì)于高效液相的管理提出了很高的要求。

1制度管理

建立和完善高效液相色譜相關(guān)管理制度，使管理制度科學(xué)化合理化規(guī)范化，在學(xué)校和學(xué)院層面建立《高效液相色譜使用、維護(hù)管理制度》，加強(qiáng)管理。由于使用人員較多，要實(shí)行提前預(yù)約制度，按照預(yù)約時(shí)間排隊(duì)。儀器使用前要熟悉儀器操作規(guī)程，不得做與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的參數(shù)設(shè)置；不得拆卸儀器，有問題要及時(shí)匯報(bào)。因?qū)嶒?yàn)人員使用不當(dāng)造成的儀器或軟件損壞由實(shí)驗(yàn)者或其負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)盡快維修。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)存放建立的文件夾，以實(shí)驗(yàn)者名字命名，數(shù)據(jù)拷貝用專用U盤，不得擅自在電腦里安裝軟件，確實(shí)需要安裝需經(jīng)過管理者同意。使用者要經(jīng)過專業(yè)的操作培訓(xùn)，合格后方可單獨(dú)操作儀器。通過規(guī)范化的制度管理，不但能提高儀器的使用率，還能延長(zhǎng)儀器的壽命。

2規(guī)范化操作管理

進(jìn)行高效液相色譜實(shí)驗(yàn)時(shí)，每個(gè)環(huán)節(jié)的操作，直接影響實(shí)驗(yàn)的成敗，有些失誤甚至?xí)斐蓛x器不同零部件的損壞，因而每個(gè)操作都要嚴(yán)謹(jǐn)和細(xì)致，因此有必要規(guī)范化操作，制定標(biāo)準(zhǔn)的操作流程。以普通的高效液相色譜儀為例，具體步驟要有嚴(yán)格的先后操作順序：（1）過濾流動(dòng)相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜。（2）對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。（3）打開HPLC工作站（包括計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀），連接好流動(dòng)相管道，連接檢測(cè)系統(tǒng)。（4）進(jìn)入HPLC控制界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動(dòng)菜單。（5）有一段時(shí)間沒用，或者換了新的流動(dòng)相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊start，沖洗時(shí)速度不要超過10ml/min。（6）調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動(dòng)相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。點(diǎn)擊injure，選用合適的流速，點(diǎn)擊on，走基線，觀察基線的情況。（7）設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file，選取selectusersandmethods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法，點(diǎn)擊newmethod。選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥，泵，檢測(cè)器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括：a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流，一般2~5分鐘；b.基線歸零；c.進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換；d.走樣時(shí)間，隨不同的樣品而不同。（8）進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，點(diǎn)擊start。進(jìn)樣，所有的樣品均需過濾。方法走完后，點(diǎn)擊postrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物。（9）關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜。只有規(guī)范具體的操作流程，才能更好地進(jìn)行分析實(shí)驗(yàn)，獲得準(zhǔn)確真實(shí)科學(xué)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，才能更好地維護(hù)好高效液相色譜儀器。

3維護(hù)管理

在使用高效液相色譜色譜儀器后一定要做好維護(hù)管理，一般來說最好的維護(hù)就是經(jīng)常規(guī)范性使用，在操作使用時(shí)充分了解儀器的注意事項(xiàng)，做到科學(xué)分析合理使用。流動(dòng)相需采用色譜純?nèi)軇殲槌兯?，?zhǔn)備所需的流動(dòng)相，以滿足儀器要求，避免損壞色譜柱;超純水須當(dāng)天配當(dāng)天用；進(jìn)樣或溶劑進(jìn)入色譜柱前須經(jīng)徹底的排氣，嚴(yán)禁氣泡進(jìn)入色譜柱;流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱后要檢查流路有沒漏液，特別是色譜柱的接頭；嚴(yán)禁100%水進(jìn)入反相色譜柱，需有一定的有機(jī)溶劑比例；嚴(yán)禁使用沒經(jīng)濾膜過濾的溶劑沖洗色譜柱，避免將互不相溶的溶劑一同進(jìn)入泵內(nèi)；流動(dòng)相需經(jīng)過濾、除氣后方可使用，用適合的0.45μm濾膜過濾，超聲脫氣20~30min；待分析的樣品必須徹底溶解澄清、過濾，配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液，用合適的0.45μm濾膜過濾，以避免堵塞、損壞色譜柱，所有通過色譜柱的液體須經(jīng)嚴(yán)格過濾；流動(dòng)相的比例須逐步過渡，不能跨度太大；流速不論是由慢到快還是由快到慢也須逐步過渡，最大流速一般不超過10ml/min；分析完成后，須及時(shí)清洗色譜柱和檢測(cè)器的比色池，原則上先用流動(dòng)相沖洗30min，再逐步過渡到100%有機(jī)溶劑（甲醇或乙腈）沖洗30min，嚴(yán)禁由一種溶劑馬上變換另一種溶劑，酸堿鹽類須先由90%水:10%甲醇沖洗30~60min，再逐步過渡到100%甲醇沖洗。長(zhǎng)時(shí)間不用色譜柱，要沖洗好后，用純甲醇或乙腈封存普通；C18柱盡量避免在40℃以上的溫度下分析，定期測(cè)柱效，有下降，可以用10％異丙醇甲醇沖洗色譜柱。每次實(shí)驗(yàn)后要做好登記使用記錄，長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)，管理人員應(yīng)該定期檢查高效液相色譜各個(gè)部件的狀況，做好相關(guān)的維護(hù)措施。

液相色譜儀范文第5篇

【關(guān)鍵詞】 元胡止痛片；，，延胡索乙素；，，高效液相色譜

摘要：目的建立元胡止痛片中延胡索乙素的含量測(cè)定方法。方法C18ODS色譜柱 (4.6 mm×250 mm， 20 μm) ； 流動(dòng)相：甲醇0.1%磷酸溶液（三乙胺調(diào)pH值至6.0）(55∶45)；檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm；流速：1.0 ml?min1。結(jié)果延胡索乙素對(duì)照品在0.153 2~0.766 0 μg范圍內(nèi)，進(jìn)樣量與峰面積間呈良好的線性關(guān)系，r=0.999 99，平均回收率為99.53%。結(jié)論該方法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，可用于控制該制劑的質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：元胡止痛片； 延胡索乙素； 高效液相色譜

元胡止痛片是2005版《中國(guó)藥典》［1］收載品種，由延胡索（醋制）、白芷2味中藥組成。具有理氣、活血、止痛功能，用于氣滯血淤的胃痛、脅痛、頭痛及痛經(jīng)等。是中藥止痛著名方劑?，F(xiàn)代研究表明，延胡索乙素具有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛，鎮(zhèn)靜，催眠等藥理作用［2］。因此，該成分是元胡止痛片中的有效活性成分之一。2005版《中國(guó)藥典》［1］收載的元胡止痛片中延胡索乙素的含量測(cè)定方法為薄層色譜掃描法，操作比較復(fù)雜。本實(shí)驗(yàn)采用HPLC法改進(jìn)延胡索乙素的含量方法，并對(duì)測(cè)定方法學(xué)進(jìn)行了研究。

1 儀器與試劑

儀器：高效液相色譜儀(日本島津CLASSVP 10AVP)；C18ODS色譜柱 (4.6 mm×250 mm， 20μm) (大連依利特) ；HP1050/3D化學(xué)工作站；樣品：元胡止痛片，自制；對(duì)照品：延胡索乙素對(duì)照品，批號(hào)：110726200208，供含量測(cè)定用（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供）； 試劑：所用試劑均為分析純、色譜純；水為重蒸餾水(自制)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺調(diào)pH值至6.0）(55∶45)為流動(dòng)相；流速1.0 ml?min1，檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm；理論板數(shù)按延胡索乙素峰計(jì)算應(yīng)不低于3 000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取延胡索乙素對(duì)照品適量，加甲醇制成每毫升含46 μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備取本品10片，除去糖衣，研細(xì)，取細(xì)粉0.50 g，精密稱定，置平底燒瓶中，精密加入濃氨試液甲醇(1∶20)混合溶液50 ml，稱定重量，冷浸1 h后加熱回流1 h，放冷，再稱定重量， 用濃氨試液甲醇(1∶20)混合溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液25 ml，置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5 ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 線性關(guān)系考察 精密稱取延胡索乙素對(duì)照品3.83 mg至25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，得混合對(duì)照品原液（153.2 μg/ml）。精密吸取對(duì)照品原液1，2，3，4，5 ml，分別至10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，分別精密吸取10 μl，注入液相色譜儀，記錄峰面積。以進(jìn)樣量(X)對(duì)峰面積(Y)作圖，得到其標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。得回歸方程Y=3.94×107 X+0.027 51，r=0.999 99， n=5。延胡索乙素對(duì)照品在在0.153 2~0.766 0 μg范圍內(nèi)，進(jìn)樣量與峰面積間呈良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度實(shí)驗(yàn) 準(zhǔn)確吸取上述對(duì)照品溶液10.0 μl，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積值，重復(fù)進(jìn)樣6次，RSD為0.42%。結(jié)果表明，本法精密度較好。

2.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取同一供試品溶液，分別于1，2，3，4，5，6 h測(cè)定延胡索乙素的峰面積值， RSD為0.78%，結(jié)果顯示供試品溶液在6 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 對(duì)同一批樣品平行制備5份供試液，分別取10.0μl，注入液相色譜儀，進(jìn)行含量測(cè)定， RSD為1.96%。表明本法重現(xiàn)性較好。

2.8 陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn) 取缺延胡索的處方藥材，按工藝制備制成缺延胡索的陰性制劑，照供試品溶液制備方法制成陰性溶液，分別吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性溶液各10.0μl，注入液相色譜儀，按上述條件進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖，從色譜圖中可以看出，方中其它成分在本測(cè)定條件下，對(duì)延胡索乙素的含量測(cè)定無干擾。見圖1~3。

圖1 對(duì)照品色譜圖（略）

圖2 樣品色譜圖 （略）

圖3 陰性樣品色譜圖（略）

2.9 加樣回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取已知含量的同一批號(hào)樣品（延胡索乙素含量為0.45 mg/g）9份，分為3個(gè)濃度組，稱樣量分別為0.17，0.25，0.32 g，每組3份，均精密稱定，3個(gè)濃度組分別精密加入對(duì)照品原液（延胡索乙素含量為0.1532 mg/ml）0.9，0.7，0.5 ml，按供試品溶液制備方法及上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果見表1。

2.10 供試樣品的含量測(cè)定 分別取不同批號(hào)的樣品，按本方法的測(cè)定條件，分別測(cè)定各樣品中延胡索乙素的含量。結(jié)果見表2。

表1 延胡索乙素加樣回收率實(shí)驗(yàn)（略）

表2 3批樣品中延胡索乙素含量測(cè)定結(jié)果（略）

3 討論

3.1 延胡索是元胡止痛片處方中的君藥，延胡索乙素是延胡索的主要活性成分之一，因此建立元胡止痛片中延胡索乙素的含量指標(biāo)具有一定的實(shí)際意義。本文的HPLC測(cè)定條件不受方中其它成分的干擾，專屬性較強(qiáng)，測(cè)試結(jié)果比較準(zhǔn)確，可用于該制劑的質(zhì)量控制。

3.2 在供試品溶液的制備方法中，我們?cè)x用甲醇超聲處理30 min，乙醇超聲處理30 min，氯仿超聲處理30 min，濃氨試液甲醇(1∶20)混合溶液超聲處理30 min，濃氨試液甲醇(1∶20)混合溶液加熱回流提取等方法，結(jié)果以濃氨試液甲醇(1∶20)混合溶液冷浸1 h后，加熱回流提取1 h，供試液測(cè)定值最高，故確定以濃氨試液甲醇(1∶20)混合溶液加熱回流提取制備供試液。

參考文獻(xiàn)