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甲胎蛋白范文第1篇

工作后，楊先生因生活不規(guī)律、飲酒應(yīng)酬等諸多因素，導(dǎo)致肝炎反復(fù)發(fā)作，但一直不愿抗病毒治療。直到40歲時(shí)，才在醫(yī)生的建議下，接受抗病毒治療。服藥后，楊先生的病情很快得到好轉(zhuǎn)。獲得滿意的療效兩年后，楊先生開始不規(guī)律復(fù)查，最后只檢查肝功能一項(xiàng)。

最近，楊先生感到肝區(qū)疼痛，查了腹部彩超，沒有發(fā)現(xiàn)明顯異常。家屬不放心，帶著他來找到我，看了近幾年的檢查單，我發(fā)現(xiàn)，除甲胎蛋白外，其他項(xiàng)目都檢查過。于是，我建議楊先生查一下甲胎蛋白。結(jié)果，數(shù)值超過500ng/ml。

接下來，楊先生分e做了肝臟硬度、增強(qiáng)CT和MRI（磁共振）等檢查，發(fā)現(xiàn)小肝癌。最終，聯(lián)系多學(xué)科會診，采取手術(shù)治療，術(shù)后效果良好，繼續(xù)抗病毒治療，監(jiān)測甲胎蛋白逐漸正常。

從這個(gè)病例中，我發(fā)現(xiàn)很多乙肝患者在所謂的“定期復(fù)查”中，只關(guān)注“轉(zhuǎn)氨酶”這樣的指標(biāo)，忽略了肝病隱藏的“危機(jī)”。很多患者，在聽到要求他們查甲胎蛋白時(shí)，會問：“甲胎蛋白是什么？監(jiān)測甲胎蛋白有什么意義？”

今天，就讓我們來認(rèn)識一下它吧！

甲胎蛋白是一種腫瘤相關(guān)蛋白，主要存在于胎兒體內(nèi)，正常情況下，成年人血液中僅有微量存在。甲胎蛋白在1956年由瑞典學(xué)者在胚胎中發(fā)現(xiàn)，1963年，其他學(xué)者相繼發(fā)現(xiàn)，肝癌患者體內(nèi)甲胎蛋白大量升高，不久，甲胎蛋白成為首個(gè)被認(rèn)定的腫瘤生物標(biāo)志物。

典型的乙肝患者，在沒有治療的情況下，其自然病程可呈現(xiàn)“三步曲”，即“活動性肝炎-肝硬化-肝癌”的變化過程。那么，在乙肝的疾病狀態(tài)下，監(jiān)測甲胎蛋白有什么意義呢？

肝炎活動期

成年急、慢性乙肝患者，炎癥活動導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死，肝臟在修復(fù)炎癥的同時(shí)，也有新生的肝細(xì)胞出現(xiàn)，這些細(xì)胞具有產(chǎn)生甲胎蛋白的能力。所以，在肝炎活動時(shí)，甲胎蛋白可以升高。不過此時(shí)一般只是低水平的升高，這種升高有時(shí)是判斷肝功能是否有恢復(fù)趨向的標(biāo)志。

肝纖維化或肝硬化

研究表明，肝發(fā)生纖維化時(shí)，很多患者會出現(xiàn)甲胎蛋白高于20ng/ml的升高，其水平與纖維化的程度密切相關(guān)。在失代償期的肝硬化患者，甲胎蛋白可以升高至超過1000ng/ml，其主要原因是，隨著肝纖維化的加重，肝臟將營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為能量的功能降低，機(jī)體需要大量的新生肝細(xì)胞來產(chǎn)生能量，而這些新生的肝細(xì)胞同時(shí)也產(chǎn)生大量的甲胎蛋白。所以，從某種意義上說，甲胎蛋白可以警示乙肝患者是否有肝硬化的傾向。

肝癌

甲胎蛋白監(jiān)測最重要的目的是早發(fā)現(xiàn)肝癌。甲胎蛋白是一種胚胎蛋白，在肝癌發(fā)生時(shí)，由于肝癌細(xì)胞比胎兒肝細(xì)胞具有更快的分裂能力，故可更迅速地產(chǎn)生大量的甲胎蛋白。在這里要注意，直徑小于2厘米的“小肝癌”，由于惡性程度低，生長緩慢，產(chǎn)生的甲胎蛋白可能較少，常表現(xiàn)為持續(xù)低水平的升高；而逐漸增大的肝癌，惡性程度大，能產(chǎn)生大量的甲胎蛋白，可以在短時(shí)間內(nèi)急劇升高。

乙肝患者中，伴有中度以上肝纖維化的肝炎或肝硬化炎癥活動時(shí)，服用抗病毒藥1～2個(gè)月后，隨著病毒載量（HBV DNA）和轉(zhuǎn)氨酶的下降，甲胎蛋白逐漸降低，這時(shí)，往往預(yù)示病情的好轉(zhuǎn)，同時(shí)也提示肝癌的可能性低。如果在服用抗病毒藥后，甲胎蛋白不降反升，則需進(jìn)一步行肝臟增強(qiáng)CT或MRI檢查，并定期復(fù)查，以及時(shí)排除或早期診斷肝癌，贏得最好的治療時(shí)機(jī)。

甲胎蛋白范文第2篇

[中圖分類號]R446[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]C [文章編號]1673-7210（2007）04（c）-142-01

神經(jīng)管畸形是常見的胎兒先天畸形，通過產(chǎn)前篩查,可及早發(fā)現(xiàn)胎兒神經(jīng)管畸形,降低畸形兒的出生。

1 材料與方法

1.1 資料來源

近2年的血清篩查記錄及隨訪記錄；超聲篩查記錄；畸形、可疑畸形登記及隨訪記錄；三級監(jiān)測網(wǎng)出生缺陷報(bào)表。

1.2 方法

1.2.1 血清篩查用時(shí)間分辨免疫熒光分析法，對孕15～20周孕婦進(jìn)行血清甲胎蛋白（AFP）、游離β-絨毛膜促性腺激素的濃度進(jìn)行檢測, 使用風(fēng)險(xiǎn)分析軟件計(jì)算神經(jīng)管畸形風(fēng)險(xiǎn)率。登記所有篩查孕婦，記錄篩查結(jié)果；神經(jīng)管畸形高風(fēng)險(xiǎn)者另行登記。設(shè)專人負(fù)責(zé)隨訪。

1.2.2 超聲篩查在孕20～24周進(jìn)行。應(yīng)用儀器LOGIQ 400 CL超聲診斷儀，探頭頻率為4.0 MHz，檢查者按照操作規(guī)程逐項(xiàng)檢查后，作出超聲診斷，并使用超聲工作站存儲記錄，確診畸形及可疑畸形另行登記。工作情況每月報(bào)表一次，并有專人負(fù)責(zé)隨訪。

1.3 流程由各區(qū)保健院婦保人員對孕15～20周孕婦在自愿的情況下，填寫產(chǎn)前篩查申請單。篩查集中在市婦幼保健所進(jìn)行，并由專職婦保專家負(fù)責(zé)咨詢工作。各助產(chǎn)單位出生或引產(chǎn)的畸形兒實(shí)行報(bào)表制度。

2 結(jié)果

5 576例血清學(xué)篩查孕婦中，檢出神經(jīng)管畸形高風(fēng)險(xiǎn)89例,全部于孕20～24周行超聲篩查，篩查出8例胎兒異常，包括脊柱裂2例，腹裂4例（其中1例于孕30周發(fā)現(xiàn)），腦積水并脊柱后凸1例，腦發(fā)育不全并隱形脊柱裂1例，均在引產(chǎn)后得到證實(shí)。其余高風(fēng)險(xiǎn)孕婦追蹤出生新生兒無異常。

10 436例做超聲篩查的孕婦中，篩查出各種畸形83例（包括上述8例），其中中樞神經(jīng)系統(tǒng)缺陷26例，包括無腦畸形8例、脊柱裂8例、腦積水6例、腦膜及腦膨出3例、全前腦1例；唇裂9例；胎兒水腫及漿膜腔積液9例；先心病7例；內(nèi)臟膨出及外翻6例；水囊狀淋巴管瘤4例；短肢畸形3例；十二指腸梗阻3例；多囊腎3例；短肢畸形3例；殘肢畸形2例；其他畸形8例。均在引產(chǎn)后得到證實(shí)。

3 討論

超聲檢查是診斷胎兒畸形的首選方法[1]，可動態(tài)地觀察胎兒的生長發(fā)育、活動，對胎兒的畸形與異常、胎盤與臍帶異常、胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩等均可由超聲作出診斷。甲胎蛋白主要在胎兒肝臟和卵黃囊中形成，孕早期即可測出母血中的AFP，孕14～20周時(shí)，AFP濃度呈線性增高，20周后逐漸下降。孕中期AFP增高與神經(jīng)管缺陷的發(fā)生有明顯的關(guān)系，胎兒其他缺陷也可使AFP增高，如腹裂。因此孕中期母血清AFP增高提示胎兒可能患有神經(jīng)管缺陷或其他異常，婦保醫(yī)生有必要對這些高風(fēng)險(xiǎn)人群作追蹤觀察，因?yàn)橛行┗位虍惓Ｔ谠型砥诓疟憩F(xiàn)出來。故孕中期應(yīng)用母血清產(chǎn)前篩查結(jié)合超聲檢查是減少出生缺陷發(fā)生的一種有效手段之一。

被篩查為神經(jīng)管畸形高風(fēng)險(xiǎn)者，往往焦慮不安，因此醫(yī)生要對孕婦解釋清楚，高風(fēng)險(xiǎn)不一定患病，但必須引起足夠的重視。

[參考文獻(xiàn)]

[1]胡義剛，劉茂功，周凱，等.產(chǎn)前超聲篩查胎兒畸形-附80例分析[J]. 中國婦幼保健雜志,2005,20(24):3286～3287.

甲胎蛋白范文第3篇

【關(guān)鍵詞】甲胎蛋白;癌胚抗原;原發(fā)性肝癌;預(yù)測診斷

Armor embryo protein and cancer embryo antigen in tumor liver cancer clinical examination application

DONG Xi-huan.The First People’s Hospital of Shangqiu,Henan 476100,China

【Abstract】 Objective To evaluate the usefulness of serum alpha-fetoprotein(AFP)and carcinoemb-ryonic antigen(CEA)carcinoma in clinical diagnosis and screening for primary hepatic carcinoma(PHC).Methods Totally 201 PHC patients,73 liver cirrhosis patients,and 54 healthy subjects were enrolled in this study.All of the sample were measured by microparticle chemiluminescent immunoassay.Results The serum AFP level was significantly higher in PHC patients than in liver cirrhosis patients and healthy subjects.The serum AFP level was increase in liver cirrhosis patients too.The serum AFP level was extremely increased in PHC patients,it could be up to 6027 μg/L,and it also increased in liver cirrhosis patients,it could be up to 1880 μg/L.Sensitivity and specificity ofAFP at 20 μg/L cut-off was 73.13%and 38.36%.Sensitivity and specificity ofAFP at 400 μg/L cut-off was only 44.28%and 80.43%.The serum CEA level was(13.4±32.6)μg/L,which was significantly higher than the other two group(P

【Key words】AFP;CEA;PHC;Predictive diagnostics

中國是世界第一肝癌大國,每年的新發(fā)病例有20萬。據(jù)2008年CSCO學(xué)術(shù)年會統(tǒng)計(jì),原發(fā)性與繼發(fā)性肝癌為世界第三大癌癥,而在中國肝癌僅次于肺癌,為中國第二大癌癥[1]。甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)是目前臨床惟一廣泛使用的原發(fā)性肝癌(hepatocellular carcinoma,PHC)診斷血清標(biāo)記物,臨床上使用AFP用于肝癌高危人群的普查和篩查可使部分患者的術(shù)后生存期和預(yù)后有了顯著的提高。癌胚抗原(carcino-embry-onic antigen related cellular adhesi on molecule 1,CEA)是一種細(xì)胞表面跨膜糖蛋白,也是癌胚抗原家族的一個(gè)成員,屬于免疫球蛋白超家族黏附分子[2]。研究表明,結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、子宮癌等患者血清CEA均呈現(xiàn)不同程度的升高[3,4]雖然在臨床上對CEA應(yīng)用的研究不多,但是其潛在優(yōu)勢值得廣泛的關(guān)注。本研究對比AFP和CEA的檢測結(jié)果,對不同人群在臨床上對癌腫與其他肝臟疾病的鑒別診斷進(jìn)行分析,探討其對各類肝病的鑒別診斷價(jià)值。探討CEA與原發(fā)性肝癌之間的關(guān)系,并通過所得數(shù)據(jù)推導(dǎo)出用CEA進(jìn)行癌癥初期診斷的閾值。

1 對象與方法

1.1 對象 選取2005年2月至2007年1月共24個(gè)月本院住院及門診的收治的PHC患者共201例,其中男178例(88.31%)、女23例(11.72%);年齡24~78歲,平均47.68歲。患者均符合2001-09中國抗癌協(xié)會肝癌專業(yè)委員會廣州會議制定的標(biāo)準(zhǔn)[5]。本院消化科收治的肝硬化患者73例,其中男57例(78.08%)、女16例(21.92%);年齡29~80,平均52.25歲。本院體檢健康人員54例,其中男41例(74.93%)、女13例(25.07%);年齡25~65歲,平均48.67歲。共分為3組,即:PHC組(n=201),肝硬化組(n=73),對照組(n=54)。

1.2 儀器及方法 儀器:雅培 AX-SY M化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。

1.2.1 試劑盒 AFP試劑盒由美國雅培公司提供。CEA試劑盒由美國貝克曼公司提供。

1.2.2 方法 所有受試者均于清晨空腹靜脈采血2~3 ml,迅速分離血清,置-20℃貯存?zhèn)錅y,測定前取出標(biāo)本,復(fù)融后檢測血清AFP及CEA濃度。操作按使用說明書進(jìn)行。

1.2.3 分析PHC患者,肝硬化患者及健康體檢者血清AFP及CEA的濃度,分析不同閾值下AFP和PHC肝硬化人群中的診斷靈敏度和特異度。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SAS9.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,P

2 結(jié)果

2.1 不同人群AFP水平 PHC患者血清AFP分布范圍為20~6027 μg/L;肝硬化患者血清的AFP分布范圍為5~1880 μg/L;健康人員血清的AFP分布范圍為0~3787 μg/L。CEA水平 PHC患者檢測結(jié)果比較見表1。

由表1可以看出,PHC患者的血清APF值與肝硬化組及對照組均有顯著性差異,(P

由表2可以看出,以20 μg/L為閾值的條件下,其診斷預(yù)測靈敏度較高(73.13%)而特異性較差(38.36%);以400 μg/L為閾值的條件下,其特異性較高(80.43%)而診斷預(yù)測靈敏度較差(44.28%)。根據(jù)本研究的數(shù)據(jù)可以看出,在兩個(gè)閾值的范圍內(nèi),陽性的預(yù)測診斷率均很高。但是對于陰性預(yù)測的準(zhǔn)確率卻低于20%。

3 討論

肝臟是人體最大的代謝功能器官,在人體正常的情況下,能起到代謝,免疫等重要的功能,但是當(dāng)肝臟受到體內(nèi)外的致病因子侵犯時(shí),其結(jié)構(gòu)與功能會受到不同程度的損害,從而產(chǎn)生各種肝病。

按病變性質(zhì)肝臟疾病可分為以下4類:①肝細(xì)胞性損害(如病毒性肝炎);②肝細(xì)胞外基質(zhì)過度增殖和沉積(如肝硬化);③膽汁瘀滯、膽管梗阻(如梗阻性黃疸);④肝內(nèi)占位性病變(癌腫)。血清膽紅素、蛋白類及酶類等常規(guī)肝功能試驗(yàn)?zāi)茌^好地反應(yīng)肝細(xì)胞的分泌、代謝、合成和損傷功能[6,7],其中肝癌是各種肝病中病死率較高的。

通過本研究可以發(fā)現(xiàn),PHC患者的血清AFP水平要顯著高于肝硬化患者和健康體檢者,而肝硬化患者血清AFP水平有顯著高于健康體檢者。因此在臨床診斷中,AFP水平升高對于PHC及肝硬化等肝病的診斷有著及其重要的價(jià)值,當(dāng)遇到血清AFP升高的患者時(shí),應(yīng)通過經(jīng)驗(yàn)的閾值,判斷患者是PHC還是肝硬化。對患者血清的AFP水平進(jìn)行動態(tài)的觀察,臨床顯示慢性肝炎肝硬化患者血清AFP水平的升高多為一過性升高或呈反復(fù)波動性,而HCC患者血清AFP升高多為穩(wěn)定持續(xù)性升高[8]。

AFP作為臨床上常用的肝癌腫瘤標(biāo)志物,常遇到相關(guān)閾值設(shè)定的問題,學(xué)術(shù)界對于閾值的設(shè)定仍存有爭議。臨床上常設(shè)定的閾值為20 μg/L及400 μg/L[8]。當(dāng)閾值設(shè)定為20 μg/L時(shí),靈敏度高,而特異性,當(dāng)閾值設(shè)定為400 μg/L時(shí),特異性高,而靈敏度也相應(yīng)的降低,通過本研究可以發(fā)現(xiàn),通過對于血清AFP的測定,可以很準(zhǔn)確的判斷PHC的發(fā)病情況。在臨床上應(yīng)用時(shí),大部分的診斷都是以20 μg/L為閾值,通過對高危人群的預(yù)測診斷,再通過醫(yī)學(xué)影像學(xué)對高于閾值的人群進(jìn)行確診?？梢赃_(dá)到良好的效果。

在AFP的廣泛應(yīng)用的同時(shí),醫(yī)療界也希望通過新的手段來加強(qiáng)對于PHC的初期預(yù)測診斷。臨床上常用的手段還有α-L-巖藻糖苷酶(AFU),鐵蛋白(SF)及鳥氨酸氨甲酰基轉(zhuǎn)移酶/丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(OCT/ALT)比值等手段來進(jìn)行PHC的初期診斷,都取得了階段性的效果,本院選用癌胚抗原(CEA)做為前期診斷,也得了一些診斷方面的經(jīng)驗(yàn)。CEA雖然沒有AFP特異性強(qiáng),敏感度高,但是作為一種抗原分子,其分布的廣泛性,表達(dá)的特異性,在癌癥的初期診斷中,有著重要的地位。雖然對于其判斷閾值學(xué)術(shù)界還沒有一個(gè)廣泛認(rèn)同的共識,但是其潛在的優(yōu)勢不容小覷。尤其是與AFP的聯(lián)合檢測,兩者可以互補(bǔ)彼此的優(yōu)勢與劣勢。AFP的特異性與CEA的廣泛性可以加強(qiáng)癌癥初期診斷的準(zhǔn)確度。降低漏診率臨床上,對于癌癥初期預(yù)測診斷雖然有了長足的進(jìn)步,但是現(xiàn)在還僅僅針對幾種特意性的癌癥有著幾種特異性的腫瘤標(biāo)志物。[9]

參考文獻(xiàn)

[1] 曹志成.第十屆中國臨床腫瘤學(xué)會學(xué)術(shù)年會紀(jì)要.中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào),2008,3,6(3):324-330.

[2] Nikia A.Laurie,Meghan egys,Marie P,et al.Carcinoembryonic Antigen-Related Cell Adhesion Molecule 1a-4L Suppression of Rat Hepatocellular Carcinomas.Cancer Res,2005,65(23):11010-11017.

[3] Castaldi F, Marino M, Beneduce L.,et al.Detection of circulating CEA-IgM complexes in early stage colorectal cancer.Int J Biol Markers,2005,20(4):204-208.

[4] Sorbye H,Dahl O.Carcinoembryonic Antigen Surge in Metastatic Colorectal Cancer Patients Responding to Oxaliplatin Combination Chemotherapy:Implications for Tumor Marker Monitoring and Guidelines.J Clin Oncol,2003,21(23):4466-4467.

[5] 中國抗癌協(xié)會肝癌專業(yè)委員會.原發(fā)性肝癌的臨床診斷與分期標(biāo)準(zhǔn).中華肝臟病雜志,2001,9(6):3241.

[6] Yang L,Parkin DM,Ferlay J,et al.Estimates of Cancer Incidence in China for 2000 and Projections for 2005.Cancer Epidemiol Biomarkers Prev,2005,14(1):2432-2501.

[7] D.Max Parkin,MD,Freddie Bray J,et al.Global Cancer Statistics,20021 CA Cancer J Clin,2005,55(2):74-108.

甲胎蛋白范文第4篇

關(guān)鍵詞：重型肝炎；前白蛋白；甲胎蛋白；臨床預(yù)后

Abstract：Objective To study the serum prealbumin（PAB）and methyl fetoprotein（AFP）level and the relationship between clinical outcomes for patients with severe hepatitis.Methods The 52 patients with severe hepatitis were collected as hepatitis group and 30 cases of healthy physical examination for the same period as the control group.Hepatitis group divided into survival group and death group according to the clinical parison between groups of PAB and AFP level.Results The PAB hepatitis group and AFP levels were significantly lower than the control group，and group was significantly lower than survival of death（P

Key words：Fulminant hepatitis；Prealbumin；AFP；Clinical outcomes

重型肝炎是指在各種致病因子的作用下，肝細(xì)胞在短期內(nèi)大量壞死所致肝功能衰竭的一類綜合征，患者的病情進(jìn)展迅速，死亡率較高[1]。本研究分析了血清前白蛋白（PAB）及甲胎蛋白（AFP）水平與重型肝炎患者臨床預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2013年1月～2014年1月，我院收治的重型肝炎患者52例作為肝炎組，其中，男29例，女23例，年齡28～80歲，平均為（45.9±6.3）歲。同期健康體檢者30例作為對照組，其中，男17例，女13例，年齡30～78歲，平均為（46.8±6.5）歲。兩組年齡與性別構(gòu)成無明顯差異（P>0.05）。

1.2方法 重型肝炎患者均在入院后次日清晨采集空腹靜脈血4ml，對照組在體檢當(dāng)日采血4ml，均不予以抗凝處理。采用散射比濁法測定PAB含量，采用放射免疫法檢測AFP含量。其中，酶聯(lián)免疫檢測儀由美國威士達(dá)公司提供，試劑盒由廣東英科新創(chuàng)公司提供；全自動生化分析儀選自日本日立公司，操作均嚴(yán)格按照說明書執(zhí)行。

1.3觀察指標(biāo) 觀察對照組與重型肝炎組的PAB及AFP水平，并統(tǒng)計(jì)肝炎組中死亡組與存活組的PAB及AFP水平，統(tǒng)計(jì)不同PAB及AFP水平重型肝炎患者的死亡率與存活率。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 數(shù)據(jù)以統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS18.0分析，以（x±s）表示計(jì)量資料，經(jīng)t檢驗(yàn)；以率（%）表示計(jì)數(shù)資料，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，P

2 結(jié)果

2.1各組PAB及AFP水平比較 肝炎組的PAB及AFP水平均顯著低于對照組，且死亡組顯著低于存活組（P

2.2不同AFP重型肝炎患者的臨床轉(zhuǎn)歸 隨著AFP水平的升高，病死率呈顯著降低趨勢（P

2.3不同PAB重型肝炎患者的臨床轉(zhuǎn)歸 隨著PAB水平的升高，病死率呈顯著降低趨勢（P

3 討論

AFP是一種胎兒早期經(jīng)肝臟合成的糖蛋白，其在新生兒時(shí)期的合成可快速受到抑制，而胚胎組織病變或者肝細(xì)胞損害時(shí)可出現(xiàn)異常變化。肝細(xì)胞癌變以及非癌性肝病是造成成人血清AFP水平異常的主要原因[2]。因此，檢測血清AFP水平能夠評估混著的肝臟修復(fù)能力以及損傷程度。本研究結(jié)果顯示，重型肝炎患者的AFP水平較健康對照組顯著降低，且死亡組明顯低于存活組。認(rèn)為AFP含量越高，患者的肝臟自我修復(fù)能力越好，臨床預(yù)后越好。

PAB是由肝臟合成的蛋白質(zhì)，其在血清中的半衰期較短，當(dāng)肝臟發(fā)生病變時(shí)，其能夠敏感性、特異性地發(fā)生變化，故可作為肝臟功能評價(jià)的敏感指標(biāo)[3]。既往研究表明，PAB水平越高，肝臟修復(fù)功能越好，反之越差[4]。本研究結(jié)果顯示，重型肝炎組的PAB水平顯著低于對照組，且死亡組較存活組顯著降低，證實(shí)了上述觀點(diǎn)。

綜上所述，血清AFP及PAB含量與重型肝炎患者的臨床預(yù)后呈負(fù)相關(guān)性，可作為評價(jià)重型肝炎臨床預(yù)后的重要指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)：

[1]方美麗.血清前白蛋白及甲胎蛋白水平在預(yù)測重型肝炎患者轉(zhuǎn)歸中的價(jià)值[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，11（18）：1509-1510.

[2]楊文秀.血清PAB、AFP與重型肝炎患者預(yù)后的關(guān)系[J].吉林醫(yī)學(xué)，2012，33（24）：5188.

甲胎蛋白范文第5篇

【摘要】 目的： 建立檢測甲胎蛋白化學(xué)發(fā)光免疫定量分析方法. 方法： 采用雙抗體異位點(diǎn)一步夾心法，以甲胎蛋白單克隆抗體作為固相包被，采用改良過碘酸鈉法進(jìn)行甲胎蛋白多克隆抗體與堿性磷酸酶偶聯(lián)制備酶標(biāo)抗體；以金剛烷胺衍生物CSPD作為底物，優(yōu)化CSPD與SapphireII發(fā)光體系；用國家標(biāo)準(zhǔn)品校定定量標(biāo)準(zhǔn)品，建立了人血清AFP的化學(xué)發(fā)光免疫定量分析法. 用該法檢測800份正常人血清，確定正常值參考范圍，將臨床血清標(biāo)本100份與bayer Acs: 180全自動發(fā)光體系統(tǒng)進(jìn)行比較. 結(jié)果： 本方法的最低檢出量為2.0 ng /mL，線性范圍2.0~600.0 ng/mL，批內(nèi)和批間的變異率分別為6.7%和7.7%，回收率在98.2%~102.5%之間. 與CEA(3 μg/mL)的交叉≤0.15%；與鐵蛋白(10 μg /mL) ≤0.04%；與人血清白蛋白（200 g/L）≤2.5×10-8，與人血清丙球蛋白（100 g/L）≤2.0×10-8，與bayer Acs:180比較相關(guān)系數(shù)r=0.994（P

【關(guān)鍵詞】 甲胎蛋白類；化學(xué)發(fā)光測定法；定量分析

【Abstract】 AIM: To establish a method of chemiluminescent immunoassay for determination of alpha fetoprotein(AFP) in human serum. METHODS: The twosite enzyme immunoassay is based on the direct sandwich technique. A monoclonal antibody was bonded to the microplate for coating and the conjugation of alkaline phosphatase to another polyclonal antibody was performed by NaIO4 method. Chemiluminescent immunoassay was established by optimizing CSPD and SapphireII luminescent system. Sensitivity， linear scope， precision， interference and recovery for the method were evaluated. The reference range was defined by testing 800 serum samples from healthy subjects.The comparison for 100 serum samples from patients was assayed by the bayer Acs:180 Automated Immunoassay system. RESULTS: The detectable minimum was 2.0 ng/mL. The linear scope was from 2.0 to 600.0 ng/mL. Average inter and intraassay were 7.7% and 6.7%， respectively. The recoveries ranged from 98.2% to 102.5%. The crossreacting rate for CEA(3 μg/mL)， Ferritin(10 μg /ml)， HAS(200 g/L)， IgG(100 g/L) were≤0.15%， 0.04%， 2.5×10-8 and 2.0×10-8， respectively. Compared with bayer Acs:180 Automated immunoassay system， the relative coefficient was 0.994（P

【Keywords】 alphafetoproteins; chemiluminescent measurements; quanti tative analysis

0引言

甲胎蛋白（AFP）為最常用的腫瘤標(biāo)志物之一. 是目前最好的可實(shí)際用于早期診斷原發(fā)性肝癌的指標(biāo)，可在癥狀出現(xiàn)前6~12 mo作出診斷. 其他一些轉(zhuǎn)移性肝癌及肝外腫瘤如腫瘤， 卵巢腫瘤，胃癌，胰腺癌，結(jié)腸癌，支氣管癌，腎癌，乳腺癌和白血病等血液中的AFP也可增高. AFP屬糖蛋白，分子量70000，含糖40 g/L，正常人血清AFP含量在2~8 μg/L之間，AFP正常值一般低于25 μg/L;本文根據(jù)化學(xué)發(fā)光免疫分析法的原理建立并研制了甲胎蛋白化學(xué)發(fā)光定量測定試劑盒，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下.

1材料和方法

1.1材料

抗AFP單抗腹水購自O(shè)EM公司；AFP多克隆抗體為自制；AFP純品抗原購自Fitzgeral公司；堿性磷酸酶（ALP）由華美生物工程公司提供；化學(xué)發(fā)光底物CSPD及增強(qiáng)劑購自PE公司；過碘酸鈉（NaIO4）、硼氫化鈉（NaBH4）、乙二醇、2，4二硝基氟苯（DNFB）均購自Sigma；Sephadex G200凝膠柱層析購自LKB公司，DE52離子交換柱購自Sigma，聚苯乙烯塑料白色不透明微孔板購自深圳金燦華；luminescent化學(xué)發(fā)光儀（芬蘭雷勃）；洗板機(jī)（BioRad）；AFP國家標(biāo)準(zhǔn)品購自中國藥品生物制品檢定所. 標(biāo)本均為血清，清亮無溶血，-20℃凍存. 分別為健康體檢門診的成年男性200份，成年女性（非妊娠女性）200份，青少年200份，老年人標(biāo)本200份，其中男女比例為1∶1；臨床標(biāo)本100份是陜西省人民醫(yī)院放免科采集的腫瘤或疑似患者血清.

1.2方法

1.2.1AFP單克隆抗體的純化抗AFP單抗腹水用500 g/L的飽和硫酸銨沉淀，再溶解透析后DE52換柱純化，分部收集，測定蛋白濃度. 蛋白濃度應(yīng)在4~10 g/L之間，無菌過濾，加1 g/L NaN3后分裝. -20℃存放.

1.2.2AFP多抗血清制備與純化純品AFP免疫健康雄性山羊，首次劑量0.5 mg/只. 4 wk后加強(qiáng)免疫，劑量減半，共加強(qiáng)免疫3次. 耳靜脈采血測定效價(jià)，雙擴(kuò)散效價(jià)>1∶128的羊，進(jìn)行心臟采血，分離血清，羊抗AFP血清按照1.3.1方法進(jìn)行純化.

1.2.3堿性磷酸酶標(biāo)記抗體的制備采用改良過碘酸鈉乙二醇法進(jìn)行標(biāo)記［1］，將獲得的IgGALP用含100 g/L小牛血清的0.05 mol/L (pH 7.6)TBS緩沖液按1∶1000稀釋成工作液，保存于-20℃.

1.2.4AFP校準(zhǔn)品制備用系列國家標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)定AFP純品抗原后，用AFP校準(zhǔn)品稀釋液稀釋成含量分別為0， 10， 25， 50， 15， 600 ng/mL系列濃度，用國家標(biāo)準(zhǔn)品做定量曲線進(jìn)行校準(zhǔn)品濃度測定、相關(guān)性分析，建立定量標(biāo)準(zhǔn)品.

1.2.5化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)的優(yōu)化［2-3］由SapphireII不同濃度的增強(qiáng)劑和CSPD組成底物工作液，進(jìn)行化學(xué)發(fā)光值（RLU）測定，進(jìn)行底物工作液的優(yōu)化.

1.2.6固相化抗體微孔板的制備［4］將抗AFP單抗用0.05 mol/L碳酸鹽緩沖液(pH 9.6)稀釋成1.0， 2.0， 5.0， 7.0， 10.0， 15.0 μg/mL的包被濃度，按100 μL/孔的量加入包被板中，37℃包被2 h，再用含10 g/L酪蛋白的0.01 mol/L PBS (pH 7.4)37℃封閉2 h后晾干備用，確定包被選擇最佳包被抗體工作濃度.

1.2.7正常人參考血清的確定用優(yōu)化好的AFP化學(xué)發(fā)光定量試劑對800份健康人標(biāo)本進(jìn)行濃度測定，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)算x+2 S，確定正常血清參考范圍.

1.2.8化學(xué)發(fā)光免疫檢測樣品或標(biāo)準(zhǔn)品于相應(yīng)孔分別加25 μL后，每孔再各加抗AFPALP75 μL，在震蕩器上混勻1 min，置37℃恒溫反應(yīng)60 min. 洗掉游離成分，加入底物工作液50 μL，ALP催化底物脫磷酸酯，并發(fā)出463 nm的可見光，第10 min后測定各加樣品孔的發(fā)光值RLU，并將數(shù)據(jù)用化學(xué)發(fā)光檢測儀定量軟件Luminoskan Ascent version 2.4.1軟件進(jìn)行定量分析.

2結(jié)果

2.1底物工作液的優(yōu)化CSPD濃度為0.8， 0.4， 0.2， 0.1 mmol/L，SapphireII濃度為2.0， 1.0， 0.5， 0.25 g/L，分別用堿性磷酸酶1∶1000， 1∶10000在5， 10 min進(jìn)行化學(xué)發(fā)光測定，記錄不同增強(qiáng)劑和CSPD濃度的發(fā)光值，分別做出CSPD濃度RLU的曲線和SapphireIIRLU的曲線（圖1）.

分析上述數(shù)據(jù)可得出以下結(jié)論CSPD在0.4 mmol/L以下時(shí)，RLU隨CSPD濃度的變化而成比例變化，在0.4 mmol/L時(shí)達(dá)到平臺，可能是底物濃度在0.4 mmol/L時(shí)使酶達(dá)到飽和. 增強(qiáng)劑SapphireII濃度對RLU的變化較復(fù)雜，在0.5~1 g/L時(shí)達(dá)到最大RLU，以后隨著增強(qiáng)劑濃度的增加RLU反而下降. 確定底物工作液配制的濃度為：0.4 mmol/L的CSPD，增強(qiáng)劑SapphireII濃度為1.0 g/L.

2.2包被抗體濃度和酶標(biāo)記抗體濃度的確定根據(jù)不同包被抗體濃度測定定量標(biāo)準(zhǔn)品的發(fā)光值，分別做出不同濃度包被抗體RLU的曲線（圖2）. 包被濃度低時(shí)試劑的整體發(fā)光值也低，隨著包被濃度的升高發(fā)光值也相應(yīng)升高，在5.0 μg/mL時(shí)，發(fā)光值達(dá)到一個(gè)平臺期（此時(shí)靈敏度達(dá)到一個(gè)平臺期），選擇標(biāo)準(zhǔn)曲線接近于直線時(shí)的包被濃度（5 μg/mL）為最佳.

2.3最低檢出量平行測定20孔零值校準(zhǔn)品血清，計(jì)算零值校準(zhǔn)品RLU平均值（x）及標(biāo)準(zhǔn)差(S)，以x+2 S為測定值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程中，求出其對應(yīng)的濃度值，所對應(yīng)的濃度值即為最低檢出量為2.0 ng/mL.

2.4特異性檢測分別測定與CEA(3 μg /mL)、鐵蛋白(10 μg /mL)、人血清蛋白(200 g/L)、人丙種球蛋白(200 g/L)的交叉反應(yīng)率，分別為≤0.15%， ≤0.04%， ≤2.5×10-8， ≤1.03×10-8.

2.5精密度測定AFP濃度為48.8~73.2 ng/mL的質(zhì)控血清，重復(fù)檢測3次，每次重復(fù)20孔，進(jìn)行精密度測定，計(jì)算批內(nèi)、批間平均變異系數(shù)分別為6.7%， 7.7%.

2.6正常人參考血清的確定對800份健康人血清檢測進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，其中有95.4%的小于8.0 ng/mL，正常濃度只有上限而無下限，上限濃度去除5%的不可信區(qū)間，同時(shí)參考放免檢測結(jié)果和目前公認(rèn)的正常值范圍，本檢測方法的正常人血清應(yīng)小于25 ng/mL.

2.7準(zhǔn)確度取3份臨床樣本分別加入5 ng/mL， 20 ng/mL， 50 ng/mL濃度的血清樣品測試樣品的加入回收率，對3份臨床樣本分別進(jìn)行90%， 60%， 30%稀釋計(jì)算稀釋回收率，結(jié)果顯示：加入平均回收率為98.6%，平均稀釋回收率為102.3%.

2.8與進(jìn)口試劑的比較［5］與bayer ACS: 180 全自動化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)的AFP試劑共同對100份臨床標(biāo)本進(jìn)行檢測，二者所得的數(shù)值進(jìn)行分析，其相關(guān)性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖3），LumiassayTM=1.2715×ACS: 180 -0.4126（n=100），（r=0.994， P

3討論

甲胎蛋白（AFP）為最常用的腫瘤標(biāo)志物之一，其定量檢測的方法主要有放射免疫法、酶聯(lián)免疫法、時(shí)間分辨熒光免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫法，各具特點(diǎn).

本研究建立的甲胎蛋白(AFP)化學(xué)發(fā)光免疫定量分析方法［6］，采用自行設(shè)計(jì)AFP多抗血清制備和純化工藝，采用改良過碘酸鈉乙二醇法對AFP多抗進(jìn)行ALP標(biāo)記，較傳統(tǒng)的戊二醛交聯(lián)法標(biāo)記效率要高，靈敏度、特異性都較好；采用金剛烷衍生物及其增強(qiáng)劑作為發(fā)光底物系統(tǒng)［7］， 其酶解速度快，達(dá)到最大光信號時(shí)間短，且發(fā)光信號強(qiáng)、持續(xù)時(shí)間長，信噪比高，通過優(yōu)化增強(qiáng)劑的濃度能使發(fā)光強(qiáng)度增強(qiáng)100~100 000倍；可測定濃度線性范圍寬，樣品無需稀釋即可檢測. 由于化學(xué)發(fā)光具有熒光的特異性，同時(shí)不需要激發(fā)光，從而避免了熒光分析中激發(fā)光雜散光的影響，有很高的靈敏度，該方法最低檢出量為2.0 ng/mL. 該方法克服了傳統(tǒng)的放射免疫法帶來的環(huán)境污染和健康危害；操作簡單，檢測自動化程度高，適用于全自動和半自動儀器.

本研究建立的方法敏感性、特異性、線性范圍、精密度、回收率均能滿足常規(guī)臨床檢測要求，其采用的是開放式反應(yīng)系統(tǒng)，因此可與大多數(shù)的化學(xué)發(fā)光檢測儀器配套使用，在臨床推廣應(yīng)用.

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